一种优化百子莲胚性愈伤组织玻璃化超低温保存效果的方法

摘要

本发明公开了一种优化百子莲胚性愈伤组织玻璃化超低温保存效果的方法，为采用含有碳纳米材料的玻璃化溶液处理大花蕙兰类原球茎以提高其保存效果，具体包括：预培养、装载液处理、玻璃化溶液处理和液氮保存步骤，其中所述玻璃化溶液含有0.1~0.5g/L石墨烯量子点。本发明中公开的方法对百子莲胚性愈伤组织的保存效果优化显著，通过添加石墨烯量子点作为外源物质对植物玻璃化超低温保存起到促进作用。

主权项

一种优化百子莲胚性愈伤组织玻璃化超低温保存效果的方法，其特征在于，采用玻璃化超低温保存的方法对百子莲胚性愈伤组织进行保存，具体步骤如下：1)预培养：将百子莲胚性愈伤组织置于预培养基上，在4℃下预培养2天；2)装载液处理：室温下，将百子莲胚性愈伤组织在装载液中浸泡处理60分钟后移除装载液；3)玻璃化溶液处理：在0℃下使用玻璃化溶液浸泡脱水处理百子莲胚性愈伤组织40分钟；4)液氮保存：保持百子莲胚性愈伤组织浸泡在玻璃化溶液的状态，并将其置于液氮中保存；所述百子莲胚性愈伤组织是继代培养20天的百子莲胚性愈伤组织；所述百子莲胚性愈伤组织预培养基为含有0.7mol/L蔗糖的MS固体培养基；所述装载液为含有2mol/L丙三醇、0.4mol/L蔗糖和10mmol/L KNO₃的MS培养液；所述玻璃化溶液为含有300g/L丙三醇，150g/L乙二醇，150g/L二甲基亚砜、0.4mol/L蔗糖和0.1～0.5g/L石墨烯量子点的MS培养液。