发明名称 |
一种特异性检测肿瘤标志物mucin 1的LAMP方法 |
摘要 |
本发明属于蛋白质组学和分子生物学技术领域,具体为一种特异性检测肿瘤标志物黏蛋白(Mucin 1)的LAMP方法。本发明利用mucin 1适配体(mucin 1 aptamer)能特异性结合黏蛋白的性质,把mucin 1 aptamer作为LAMP反应中的F3引物,使其特异性结合Mucin 1黏蛋白,从而根据F3参与LAMP扩增反应后荧光强度来间接检测糖蛋白Mucin 1的含量;其中,本发明设计七组引物,用于LAMP扩增反应;并筛选出一组优化引物,用于对黏蛋白进行灵敏度检测。本发明方法操作简便、特异性高、灵敏度高,通过LAMP核酸扩增方法高灵敏的检测低丰度蛋白含量。 |
申请公布号 |
CN104862309A |
申请公布日期 |
2015.08.26 |
申请号 |
CN201510195404.5 |
申请日期 |
2015.04.22 |
申请人 |
复旦大学 |
发明人 |
曹宏梅;方雪恩;孙玥;孔继烈 |
分类号 |
C12N15/11(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/11(2006.01)I |
代理机构 |
上海正旦专利代理有限公司 31200 |
代理人 |
陆飞;盛志范 |
主权项 |
一种检测肿瘤标志物黏蛋白的LAMP引物组,其特征在于以mucin 1 aptamer 作为F<sub>3</sub>引物,还有利用primer designer 软件设计的七组引物:B<sub>3</sub>,BIP,FIP;分为外引物B<sub>3</sub>和F<sub>3</sub>,内引物FIP和内引物BIP,其引物序列分别如下所示:F3: SEQ.ID.NO1;以及第1组:B<sub>3</sub>: SEQ.ID.NO2FIP: SEQ.ID.NO3BIP: SEQ.ID.NO4第2组:B<sub>3</sub>: SEQ.ID.NO5FIP: SEQ.ID.NO6BIP: SEQ.ID.NO7第3组:B<sub>3</sub>: SEQ.ID.NO8FIP: SEQ.ID.NO9BIP: SEQ.ID.NO10第4组:B<sub>3</sub>: SEQ.ID.NO11FIP: SEQ.ID.NO12BIP: SEQ.ID.NO13第5组:B<sub>3</sub>: SEQ.ID.NO14FIP: SEQ.ID.NO15BIP: SEQ.ID.NO16第6组:B<sub>3</sub>: EQ.ID.NO17FIP: SEQ.ID.NO18BIP: SEQ.ID.NO19第7组:B<sub>3</sub>: SEQ.ID.NO20 FIP: SEQ.ID.NO21 BIP: SEQ.ID.NO22 。 |
地址 |
200433 上海市杨浦区邯郸路220号 |