一种快速高通量可直接测量细胞表面自由能的方法

摘要

本发明一种快速高通量可直接测量细胞表面自由能的方法，步骤为：首先准备一系列表面张力已知的不同液体，接着分别取上述液体注入离心管内，再把细胞悬浮液注入上述表面张力不同的液体中，并采用试管搅拌器充分混合液体和细胞悬浮液；之后，静置离心管10分钟，再采用离心机将上述1.5 mL离心管内的细胞悬浮液在1000 rpm下离心1分钟，加速细胞在液体中的聚集和沉降；之后，取出离心管，在离心管架上静置2分钟，采用移液器分别在各1.5 mL离心管中取出200 μL上清液体，依次注入96孔板的每个孔内；然后采用微孔板分光光度计，测量孔板内上清液体的光密度，其光密度最大时所对应的液体表面张力即可视作细胞的表面自由能。

主权项

一种快速高通量可直接测量细胞表面自由能的方法，具体包括以下步骤： (1)    配置表面张力在20~50 mJ m^‑2之间均匀分布的一系列液体，同时将所配置的溶液按表面张力从小到大依次排列，分别编号；(2)     取10 mL海水小球藻细胞悬浮液放入15 mL离心管内，采用0.1 M，PH=7的磷酸缓冲液离心‑清洗3次，以将杂质颗粒或细胞碎片清除，再将清洗后的细胞再悬浮于新鲜的f/2培养液中，同时将上述10 mL海水小球藻细胞悬浮液浓缩成1 mL, 并放于1.5 mL离心管内，最后，将再悬浮处理后的细胞悬浮液采用试管搅拌器涡旋搅拌20秒，接着超声震动2 min， 以使细胞在液体中均匀分布，并完全分散；(3)     准备若干个1.5 mL的离心管，将所配置的已知表面张力的若干个溶液分别采用移液器移取1 mL放于标好号的离心管中；(4)     将5 μL清洗浓缩后的海水小球藻细胞悬浮液采用移液器注入放有不同表面张力溶液的的1.5 mL离心管内，采用试管搅拌器涡旋搅拌30 s 后，将离心管依次放在离心管架上；(5)     采用离心机将离心管内的细胞悬浮液离心分离，离心机转速1000rpm，离心时间1分钟；分别采用移液器依次移取离心后离心管内上清液体200 μL，依次注入96孔板；(6)     采用微孔板分光光度计测量96孔板内上清海水小球藻细胞悬浮液的光密度，光密度最高时所对应的液体的表面张力即为海水小球藻细胞的表面自由能，即为35.7 mJ m^‑2。