一种铁皮石斛药用原球茎大型生物反应器克隆生产工艺

摘要

本发明公开了一种铁皮石斛药用原球茎大型生物反应器克隆生产工艺，属于生物工程技术领域，所述的大型生物反应器为150升植物细胞专用反应器，具有光照、控温、补料、搅拌、无菌取样、无菌出料、进气过滤和远程控制功能；所述的原球茎克隆生产工艺，步骤包括：种胚微粒诱导萌发，将原球茎种子接入150升植物细胞专用反应器中，经暗培养阶段、光照培养阶段和阶段补料，40天后收集原球茎。测定石斛多糖含量为48%，甘露糖33%，灰分为4.5%，浸出物16.3%。与传统原球球茎组培相比，本发明具有生产规模大，生产成本低，生产过程中无污染，增殖倍数可达40-60倍，石斛药效成份表达稳定、表达量高，克隆生产全程可控，产品安全系数高。

主权项

一种铁皮石斛药用原球茎大型生物反应器克隆生产工艺，步骤包括：种胚微粒诱导萌发，得到原球茎种子，配制克隆生产培养基和补料培养基，转入150升植物细胞专用反应器中，在位灭菌后将原球茎种子接入，先后进行暗培养和光照培养，完成培养收集原球茎后进行称重换算增殖系数并按药典标准进行检测。