产蛋鸡肠道内源性芥子碱降解菌分离培养方法

摘要

本发明提供一种培养基组成简单、培养条件可控性和特异性强、分离效果好的产蛋鸡肠道内源性芥子碱降解菌的分离培养方法。产蛋鸡肠道内源性芥子碱降解菌分离培养方法，该方法包括以下步骤：1)富集培养基制备；2)产蛋鸡肠道内容物收集；3)富集培养；4)分离培养基制备；5)分离培养。本发明的培养基组成简单、培养条件可控性强、操作简便，分离效果好，专一性强；采用本发明的培养条件可以有效分离培养出产蛋鸡肠道具有芥子碱降解功能的菌株。本发明特别适合于产蛋鸡肠道内源性芥子碱降解菌的分离培养。

主权项

产蛋鸡肠道内源性芥子碱降解菌分离培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1)富集培养基制备：将NaNO₃：1‑5g；K₂HPO₄：0.5‑2g；MgSO₄.7H₂O：0.3‑2g；KCl：0.3‑2g；FeSO₄：0.01‑0.1g；芥子碱硫氰酸盐：2‑5g；水：800‑1200ml混合均匀，倒入瓶中，密封瓶口后灭菌备用；2)产蛋鸡肠道内容物收集：取空肠和回肠各一段，备用；3)富集培养：在所取肠段样品表面开一切口，将灭菌棉签伸入切口内，尽量将内容物搅动均匀，取下步骤1)制备的含培养基的灭菌瓶塞，将含肠道内容物的棉签浸入培养基内，搅动数次，让肠道内容物与培养基充分接触，再塞紧瓶口，将瓶置水浴或空气摇床上34‑37℃富集培养5‑8天；4)分离培养基制备：将NaNO₃：1‑5g；K₂HPO₄：0.5‑2g；MgSO₄.7H₂O：0.3‑2g；KCl：0.3‑2g；FeSO₄：0.01‑0.1g；芥子碱硫氰酸盐：2‑5g；琼脂：10‑30g；水：800‑1200ml，混合均匀后，倒入培养皿，密封皿口后灭菌备用；5)分离培养：无菌条件下，在步骤3)所得到的富集培养基上挑选单一菌落，接种到步骤4)所得到的分离培养基上，34‑37℃分离培养5‑8天，分纯后保种即得。