一种花生四烯酸的制备方法

摘要

一种花生四烯酸的制备方法，涉及花生四烯酸。对高山被孢霉产ARA的培养条件进行优化，在基础培养基分批发酵，在优化培养基中以酵母粉和玉米浆为氮源分批发酵，再以酵母粉为氮源进行的发酵罐放大实验，对高山被孢霉在优化培养基中以玉米浆和酵母粉为混合氮源进行培养，将优化培养基中的氮源替换为玉米浆和酵母粉，得混合氮源优化培养基；对高山被孢霉在混合氮源优化培养基中分批发酵；对高山被孢霉高糖驯化及对驯化后的菌种在混合氮源优化培养基中分批发酵，在当葡萄糖浓度降至10g/L时，流加600g/L葡萄糖，使残糖控制在10g/L左右，培养168h后开始收获干菌体、油脂和ARA。

主权项

一种花生四烯酸的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)通过摇瓶实验对高山被孢霉产ARA的培养条件进行优化，所述优化的方法为取4mL种子液接入装有50mL基础培养基的250mL三角瓶，28℃、150rpm培养5～6d，得到优化培养基，再加入混合微量元素和混合维生素；所述基础培养基的组成为：葡萄糖40g/L，酵母粉5g/L，MgSO₄‑7H₂O 0.1g/L，KH₂PO₄0.5g/L，CaCO₃0.05g/L，ZnSO₄‑7H₂O 0.1g/L，pH 6.0；所述优化培养基的组成为：葡萄糖60g/L，酵母粉或玉米浆10g/L，谷氨酸1.0g/L，MgSO₄‑7H₂O0.1g/L，KH₂PO₄2.0g/L，CaCO₃0.05g/L，ZnSO₄‑7H₂O 0.1g/L，pH调至6.0；混合微量元素的加入量为1mL/L；混合维生素的加入量为1mL/L；所述混合微量元素包括FeCl₃·6H₂O,、H₃BO₃、MnCl₂·4H₂O、CoCl₂·6H₂O、CuSO₄·5H₂O、NiSO₄·6H₂O；所述混合维生素包括维生素B₁₂、生物素、维生素B₁、泛酸钙；2)对高山被孢霉在基础培养基中进行了2L分批发酵，培养至第168h，开始收获菌体，获得干菌体、油脂和ARA。