一种人工合成的麦胚肽及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及生物医药领域，公开了一种人工合成的具有抗氧化应激活性的麦胚肽，并公开了其制备方法和作为抗氧化剂的应用。本发明所述麦胚肽利用Fmoc固相化学法合成，含有3个氨基酸残基，序列为Arg-Val-Phe，结构式如下。试验表明其可通过维护细胞膜完整性、提高细胞活力、增强线粒体膜酶活等方式保护氧化损伤的神经细胞，对H₂O₂诱导人神经细胞的氧化应激和凋亡具有显著的保护作用。

主权项

一种人工合成的具有抗氧化应激活性的麦胚肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)树脂溶胀；(2)脱除氨基保护；(3)二肽的合成；(4)三肽的合成；(5)麦胚肽树脂切割；(6)析出麦胚肽；其中，所述步骤(1)为将30mmol的Fmoc‑L‑苯丙氨酸‑王树脂置于反应器中，用300mL二氯甲烷浸泡，待树脂膨胀，溶胀30min，抽滤除去二氯甲烷；所述步骤(2)为加入体积比为2:8的六氢吡啶与N,N‑二甲基甲酰胺混合溶液浸泡步骤(1)所得树脂，使用氮气鼓动，反应结束后用N,N‑二甲基甲酰胺洗涤树脂；所述步骤(3)为将溶有18mmol Fmoc‑L‑缬氨酸的溶液150mL与溶有100mmol N,N'‑二异丙基碳酰亚胺和90mmol 1‑羟基苯骈三氮唑的溶液120mL在冰浴下混合，反应0.5h；然后与步骤(2)处理过的树脂混合，再加16.5mmol的4‑二甲氨基吡啶，室温下反应5h；过滤，用N,N‑二甲基甲酰胺、二氯甲烷、甲醇分别洗涤三次，每次3min；将450mL无水吡啶、90mL乙酸酐溶于600mL N,N‑二甲基甲酰胺后倒入树脂中，反应2h；反应结束后用N,N‑二甲基甲酰胺、二氯甲烷、甲醇各1000mL轮流洗涤树脂三次，每次3min，真空干燥；所述步骤(4)为重复步骤(2)‑(3)，将步骤(3)中的Fmoc‑L‑缬氨酸替换为Fmoc‑L‑精氨酸，连接Fmoc‑L‑精氨酸完成三肽合成，将树脂用二氯甲烷和乙醚浸泡后抽干。