一种蟾酥药材中蟾蜍甾二烯类成分指纹图谱的检测方法及其应用

摘要

本发明提供一种蟾酥药材中蟾蜍甾二烯类成分指纹图谱的检测方法，包括主要步骤为：供试品溶液及对照品溶液的制备、测定并获得供试品溶液和对照品溶液的液相色谱图，经与对照品溶液的液相色谱图比较后，得到供试品溶液中5种蟾蜍甾二烯类成分的指纹图谱。本发明还进一步提供了上述指纹图谱检测方法在蟾酥药材中5种蟾蜍甾二烯类成分含量测定中的应用。本发明通过对蟾蜍甾二烯类成分的指纹图谱和含量分析，可以反映蟾酥药材的内在质量，为蟾酥药材判断真伪、评价优劣、考察稳定性和一致性提供依据，为蟾酥的临床用药提供参考。同时，本发明中所建立的检测方法快速准确，灵敏度高，可作为蟾酥质量定性定量控制和应用的可靠手段。

主权项

一种蟾酥药材中蟾蜍甾二烯类成分指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备：称取蟾酥细粉，加入甲醇，称重，超声提取，冷却后，再称重，用甲醇补足失重，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液；2)对照品溶液的制备：分别精密称取日蟾毒它灵、蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基对照品适量，加甲醇溶解并定容，摇匀，得到混合对照品溶液；3)测定：采用相同色谱条件的高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与对照品溶液的液相色谱图进行比较，根据相对保留时间，指认出5个共有特征峰，确认供试品溶液中5种蟾蜍甾二烯类成分的特征峰，从而获得供试品溶液中5种蟾蜍甾二烯类成分的指纹图谱；所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：Agilent Zorbax SB‑C₁₈；柱温：25～30℃；检测波长：296nm；流速：0.8～1.0ml/min；进样量：1～20μl；流动相：乙腈‑0.5v/v％甲酸水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.5v/v％甲酸水溶液；分析时间：60min；梯度洗脱；所述梯度洗脱的具体程序为：0～20min，A相：B相体积比为20：80‑30：70；20～25min，A相：B相体积比为30：70‑35：65；25～40min，A相：B相体积比为35：65‑40：60；40～50min，A相：B相体积比为40：60‑50：50；50～60min，A相：B相体积比为50：50。