一种变性抗原亲和纯化抗体方法

摘要

本发明涉及一种抗原亲和纯化抗体的新方法，其在制备抗原层析柱过程中，先将抗原在含尿素的介质中与固相载体发生偶联；随后将尿素浓度逐渐降低，使与固相物相连的抗原实现“原位复性”，从而保证了后续抗体亲和纯化过程在水溶液介质中完成。本发明的有益效果是，可以将变性抗原蛋白(如原核表达的包涵体蛋白)直接偶联在固相载体以纯化抗体，简化了操作步骤，即制备可溶性抗原蛋白过程。该方法可操作性强，耗费低廉，所得抗体具有极高的纯度和特异性，适合于实验室制备和工业生产中应用。

主权项

一种变性抗原亲和纯化抗体方法，其特征在于：在制备抗原层析柱过程中，先将不溶性抗原溶解于含6M尿素的磷酸缓冲液，即偶联缓冲液中，再用偶联剂将抗原连接在固相载体上，随后用含有梯度浓度6M、4M、2M、1M、0.5M和0M的尿素的洗涤液洗去未结合的抗原和偶联剂，完成抗原层析柱制备，进而使后续抗体亲和过程在水溶液介质中完成。