苏云金芽胞杆菌cry1Ah/cry1Ie双价基因表达载体及其应用

摘要

本发明涉及苏云金芽胞杆菌cry1Ah/cry1Ie双价基因表达载体及其应用，属于生物技术领域。以pCIABIA3301为载体骨架，在其多克隆位点上插入有m2-cry1Ah和m2-cry1Ie基因，得到表达载体pMAhIeb。利用农杆菌介导法将所构建的表达载体转化玉米自交系品种，获得了高抗转双价基因玉米转化事件。通过对这两个转化事件的Cry1Ah蛋白的表达和遗传稳定性进行研究，表明Cry1Ah蛋白在T1～T2代的玉米植株中都能正常稳定的表达，而且表达量非常高，并且植株在田间对玉米螟的抗性也是稳定遗传的。获得的抗虫转基因玉米材料具有很好的应用价值，可以作为候选材料进行下一步Bt抗虫玉米的育种工作。

主权项

一种表达载体，其特征在于：以pCAMBIA3300为载体骨架，在其多克隆位点上插入有m2‑cry1Ah和m2‑cry1Ie基因，所述m2‑cry1Ah基因序列如SEQ ID NO：1所示，所述m2‑cry1Ie基因序列如SEQ ID NO：2所示；所述表达载体命名为pMAhIeb，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。