发明名称 |
稳定高表达OS-9的细胞株的构建方法和应用 |
摘要 |
本发明提供了一种稳定高表达OS-9的细胞株的构建方法,属于分子生物技术领域。该方法包括将plenti6.3载体和OS-9基因连接,并转化感受态大肠杆菌;将转后的大肠杆菌进行质粒提取,获得plenti6.3-OS-9质粒;以所述plenti6.3-OS-9质粒转染293T细胞,收获病毒液,并以所述病毒液感染Caco-2细胞后筛选出阳性克隆,培养10-15天后,获得稳定高表达OS-9的细胞株。该细胞株,方便了在研究OS-9过表达的状态下,其他功能性蛋白的表达情况,为OS-9过表达与其他功能性蛋白表达关系的研究提供了材料。可通过western blot、免疫荧光等操作进行相关蛋白的定量和定性。 |
申请公布号 |
CN104830778A |
申请公布日期 |
2015.08.12 |
申请号 |
CN201510205030.0 |
申请日期 |
2015.04.27 |
申请人 |
孙力华 |
发明人 |
孙力华;杨桦;肖卫东;王文生 |
分类号 |
C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I |
主分类号 |
C12N5/10(2006.01)I |
代理机构 |
北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 |
代理人 |
栾波 |
主权项 |
一种稳定高表达OS‑9的细胞株的构建方法,其特征在于,包括:将plenti6.3载体和OS‑9基因连接,并转化感受态大肠杆菌;将转后的大肠杆菌进行质粒提取,获得plenti6.3‑OS‑9质粒;以所述plenti6.3‑OS‑9质粒转染293T细胞,收获病毒液,并以所述病毒液感染Caco‑2细胞后筛选出阳性克隆,培养10‑15天后,获得稳定高表达OS‑9的细胞株。 |
地址 |
400020 重庆市江北区华新村213号附45号23-10 |