发明名称 稳定高表达OS-9的细胞株的构建方法和应用
摘要 本发明提供了一种稳定高表达OS-9的细胞株的构建方法,属于分子生物技术领域。该方法包括将plenti6.3载体和OS-9基因连接,并转化感受态大肠杆菌;将转后的大肠杆菌进行质粒提取,获得plenti6.3-OS-9质粒;以所述plenti6.3-OS-9质粒转染293T细胞,收获病毒液,并以所述病毒液感染Caco-2细胞后筛选出阳性克隆,培养10-15天后,获得稳定高表达OS-9的细胞株。该细胞株,方便了在研究OS-9过表达的状态下,其他功能性蛋白的表达情况,为OS-9过表达与其他功能性蛋白表达关系的研究提供了材料。可通过western blot、免疫荧光等操作进行相关蛋白的定量和定性。
申请公布号 CN104830778A 申请公布日期 2015.08.12
申请号 CN201510205030.0 申请日期 2015.04.27
申请人 孙力华 发明人 孙力华;杨桦;肖卫东;王文生
分类号 C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I 主分类号 C12N5/10(2006.01)I
代理机构 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 代理人 栾波
主权项 一种稳定高表达OS‑9的细胞株的构建方法,其特征在于,包括:将plenti6.3载体和OS‑9基因连接,并转化感受态大肠杆菌;将转后的大肠杆菌进行质粒提取,获得plenti6.3‑OS‑9质粒;以所述plenti6.3‑OS‑9质粒转染293T细胞,收获病毒液,并以所述病毒液感染Caco‑2细胞后筛选出阳性克隆,培养10‑15天后,获得稳定高表达OS‑9的细胞株。
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