用于紫罗兰酮检测的纳米杯阵列生物传感器件的制备方法

摘要

本发明公开了一种用于紫罗兰酮检测的纳米杯阵列生物传感器件的制备方法，该方法采用纳米压印技术构造纳米尺寸杯状结构，并在纳米杯侧壁沉积纳米金颗粒，依赖纳米金属颗粒的静电吸附作用将气味结合蛋白Acer-ASP2固定于纳米杯侧壁；检测时，目标分子紫罗兰酮与气味结合蛋白Acer-ASP2的特异性结合引起纳米杯侧壁光学折射特性的改变，导致通过器件的透射光光谱的相应变化，实现对目标分子紫罗兰酮的检测；较传统的紫罗兰酮检测手段，本发明在光学检测手段的高灵敏度和特异性的优点的基础上，避免了光学检测所需的复杂光路，其操作简单便捷。

主权项

一种用于紫罗兰酮检测的纳米杯阵列生物传感器件的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）加工传感器件纳米杯阵列结构：首先在聚对苯二甲酸乙二醇酯材料上均匀涂敷UV固化胶作为粘附层，接着使用锥形纳米柱阵列模板在粘附层压印纳米杯几何结构阵列；而后在室温下以105mW/cm²功率密度照射紫外光60s，使纳米杯阵列传感器件固化成型；（2）沉积传感器件纳米金颗粒：首先，用1M NaOH水溶液浸泡纳米杯阵列器件5‑10min用于除去纳米结构表面的无机污染物；然后，在纳米杯侧壁上沉积一层5‑10nm厚的钛金属作为中间粘连层，以提高纳米金颗粒的沉积效率；最后，采用电子束蒸发的方式在粘连层上沉积90nm厚的纳米金颗粒层；（3）固定传感器件气味结合蛋白Acer‑ASP2：首先，依次使用无水乙醇和超纯水超声清洗步骤（2）沉积了纳米金颗粒的纳米杯阵列传感器件各5min；将清洗后的器件浸泡在600μg/ml 的气味结合蛋白Acer‑ASP2溶液中，室温下浸泡2h，气味结合蛋白Acer‑ASP2溶液的溶剂为PBS缓冲液，取出后用PBS缓冲液反复清洗，洗去纳米结构表面的非静电吸附的气味结合蛋白Acer‑ASP2，用氮气吹干，获得所述的用于紫罗兰酮检测的纳米杯阵列生物传感器件，放在4℃条件下保存备用。