一种提高红小豆降血糖效果的物质的确定方法

摘要

本发明公开了一种提高红小豆降血糖效果的物质的确定方法，涉及物质的确定方法。所述方法包括下列步骤：（1）未经过挤压膨化的红小豆的蛋白和多糖的纯化：A、粉碎、筛选；B、蛋白纯化；C、粗多糖纯化；（2）经过挤压膨化的红小豆蛋白和多糖液纯化：A、粉碎、筛选；B、加水搅拌；C、挤压膨化；D、粉碎、筛选；E、蛋白纯化；F、粗多糖纯化；（3）利用体外测定糖苷酶一致的方法比较经过挤压膨胀前后的蛋白和多糖对α糖苷酶的抑制活性。通过比较挤压膨化前后的物质成分变化，很容易发现经过挤压膨胀的蛋白和多糖含量显著增高。利用体外测定糖苷酶一致的方法，能够轻松测定经过挤压膨化的红小豆粉与未经过挤压膨化红小豆粉的糖苷酶抑制率。

主权项

一种提高红小豆降血糖效果的物质的确定方法，包括下列步骤：(1)未经过挤压膨化的红小豆的蛋白和多糖的纯化：A、粉碎、筛选：取红小豆，粉碎、过筛，测定获得的物质的成分；B、蛋白纯化：采用常规酸碱沉降法进行蛋白纯化；C、粗多糖常规纯化：a、粗多糖液制备；b、粗多糖纯化；(2)经过挤压膨化的红小豆的蛋白和多糖液纯化：A、粉碎、筛选：另取红小豆，粉碎、过筛，测定获得的物质的成分；B、加水搅拌：在红小豆粉中添加8‑10％的水，搅拌均匀；C、挤压膨化：取搅拌后的红小豆粉，进行挤压膨化；D、粉碎、筛选：将挤压膨化后的红小豆粉粉碎、过筛；E、蛋白纯化：采用常规酸碱沉降法进行蛋白纯化；F、粗多糖常规纯化：a、粗多糖液制备；b、粗多糖纯化；(3)利用体外测定糖苷酶一致的方法比较经过挤压膨胀前后的蛋白和多糖对α糖苷酶的抑制活性；所述进行蛋白纯化的酸碱沉降法的具体做法为：称取原料粉末用蒸馏水按照1：8比例浸泡过夜，3500r离心5‑15min，收集上清用1M氢氧化钠调pH到8.0‑10.0，磁力搅拌25‑35min，5000r离心15‑25min，收集上清液。用1N盐酸调pH到6.0‑8.0，5000r离心15‑25min，弃去上清液，沉淀用去离子水润洗2‑3遍，冻干备用；所述粗多糖液制备的具体做法为：称取原料粉，浸泡20‑40min，加15‑25倍量水超声溶解豆粉，溶液加无水乙醇使含醇量达70‑90％，3‑5℃冷藏过夜，3500r离心15‑25min，沉淀加5‑15mL水溶解，得到粗多糖液；所述粗多糖纯化的具体做法为：粗多糖液加10％三氯乙酸水溶液0.5‑1.5mL，3‑5℃冷藏过夜，3500r离心15‑25min，取上清液，再加无水乙醇使含醇量达到70‑90％，3‑5℃冷藏过夜，4500r离心5‑10min，弃去上清液，沉淀加5‑15mL水溶解再加0.5％活性炭，沸水煮25‑35min，过滤，加蒸馏水定容于25mL容量瓶；所述挤压膨化过程中的挤压机Ⅰ区温度范围为140‑180℃、Ⅱ区温度范围为120‑160℃。