发明名称 |
一种多基因叠加顺式表达的酵母载体及其构建方法和应用 |
摘要 |
一种可用于多个基因叠加顺式表达的载体,其特征是:含有两对同尾酶的限制性酶切位点序列,通过这两对同尾酶可以实现多个基因叠加在同一个载体中。所述载体的构建方法是通过PCR定点突变在启动子上游和终止子下游分别引入相应的限制性内切酶识别序列。在该表达载体中,每个基因都带有独立的启动子和终止子,构成独立的表达元件,再利用同尾酶实现独立表达元件的叠加组装,各基因的表达相对独立。该载体实现多个基因叠加非常方便快捷只需将目的基因分别克隆至表达载体的多克隆位点处,再利用两对同尾酶完成后续的组装。 |
申请公布号 |
CN104830893A |
申请公布日期 |
2015.08.12 |
申请号 |
CN201510237093.4 |
申请日期 |
2015.05.11 |
申请人 |
中国农业科学院生物技术研究所 |
发明人 |
徐玉泉;王晓婧;张维;刘航 |
分类号 |
C12N15/81(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/81(2006.01)I |
代理机构 |
北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 |
代理人 |
张涛 |
主权项 |
一种可用于多个基因叠加顺式表达的载体,其特征是:含有两对同尾酶的限制性内切酶酶切位点序列,且通过这两对同尾酶可以实现多个基因叠加在同一个表达载体上;所用的表达载体源于酵母表达载体、pET系列的原核表达载体或真核表达载体pEGFP。 |
地址 |
100081 北京市海淀区中关村南大街12号 |