靶向修饰的纯合生物体

摘要

本文公开了纯合修饰生物体以及制备和使用这些生物体的方法。

主权项

一种用于产生靶向修饰的纯合植物的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：(a)一对锌指核酸酶，其中每个锌指核酸酶结合所述植物的基因组的选定靶基因座中至少12个核苷酸的靶位点；(b)用于靶向整合入选定靶基因座内的一种或多种外源序列；以及(c)对以下事项的说明：(i)将核酸酶和外源序列引入细胞；(ii)鉴定含有一种或多种外源序列插入选定靶基因座第一等位基因内的细胞；(iii)鉴定在选定靶基因座的第二等位基因处包含修饰的(ii)所得细胞；(iv)将(iii)所得细胞生长至繁殖上成熟的植物；(v)将(iv)所得植物杂交；以及(vi)鉴定(v)的杂交的就靶向基因修饰而言纯合的子代。