发明名称 |
产γ-氨基丁酸的重组菌及其构建方法与应用 |
摘要 |
本发明公开了产γ-氨基丁酸的重组菌及其构建方法与应用。采用本发明的方法将谷氨酸脱羧酶B基因(gadB基因)通过表达载体pBAD/HisB导入到大肠杆菌突变株K12ΔgadABC中构建的基因工程菌KG01阻断了γ-氨基丁酸的降解途径并且钝化了谷氨酸:γ-氨基丁酸反向转运蛋白对pH的敏感性,有效地减少了γ-氨基丁酸的降解提高了GABA的产量和转化效率。KG01菌株的转化率不受pH变化的影响,而且GABA的产量最高,明显高于K12ΔgabT菌株和K12菌株。以浓度为2M的谷氨酸为底物,KG01菌株连续转化三次,每次的转化率均在99%以上,产量均大于204g/L,底物残留量低,便于下游结晶精制。采用本发明的方法构建的基因工程菌生产γ-氨基丁酸,具有原料低廉,工艺简单,生产效率高等优点,具有良好的工业化应用前景。 |
申请公布号 |
CN104830886A |
申请公布日期 |
2015.08.12 |
申请号 |
CN201510229161.2 |
申请日期 |
2015.05.07 |
申请人 |
福建师范大学 |
发明人 |
柯崇榕;黄建忠;陶勇;杨欣伟;胡美荣;饶焕新;曾文超 |
分类号 |
C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P13/00(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/70(2006.01)I |
代理机构 |
北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 |
代理人 |
关畅;任凤华 |
主权项 |
产γ‑氨基丁酸的重组菌的构建方法,包括将谷氨酸脱羧酶B基因导入受体菌得到产γ‑氨基丁酸的重组菌;所述受体菌为突变型大肠杆菌或野生型大肠杆菌;所述谷氨酸脱羧酶B基因编码a1或a2的蛋白质:a1、氨基酸序列是SEQ ID No.1的蛋白质;a2、在SEQ ID No.1所示的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有谷氨酸脱羧酶B活性的由a1衍生的蛋白质。 |
地址 |
350117 福建省福州市大学城科技路1号福建师范大学旗山校区 |