光热和光动联合抗肿瘤的以叶酸介导的金纳米星为载体的药物传递系统的制备方法及应用

摘要

本发明涉及光热和光动联合抗肿瘤的以叶酸介导的金纳米星为载体的药物传递系统的制备方法及应用，可有效解决现有抗肿瘤药物毒副作用大，生物相容性差，靶向性差的问题，方法是，将金纳米星表面通过共价键连接上具有反应活性的氨基和羧基后，再通过酰胺反应连接靶向分子，得到主动靶向的金纳米星溶液；再通过靶向化合物末端的氨基和近红外荧光探针进行化学反应，得到具有叶酸靶向和近红外荧光成像的金纳米星溶液；然后再直接通过静电吸附作用负载抗肿瘤药物阿霉素于金纳米星表面，即得，本发明体物理化学稳定性良好，制备工艺简单且原料来源丰富，成本低，毒副作用小，能有效抑制肿瘤细胞增殖。

主权项

一种光热和光动联合抗肿瘤的以叶酸介导的金纳米星为载体的药物传递系统的制备方法，其特征在于，将金纳米星表面通过共价键连接上具有反应活性的氨基和羧基后，再通过酰胺反应连接靶向分子，得到主动靶向的金纳米星溶液；再通过靶向化合物末端的氨基和近红外荧光探针进行化学反应，得到具有叶酸靶向和近红外荧光成像的金纳米星溶液；然后再直接通过静电吸附作用负载抗肿瘤药物阿霉素于金纳米星表面，即得到叶酸介导的多功能金纳米星用于光热和光动联合抗肿瘤的药物传递系统，阿霉素和金纳米星的质量比为1.5～3：1，具体制备方法如下：（1）制备氨基化的金纳米星：在18～25℃，300～720r/min的磁力搅拌条件下，加入浓度为50μg/mL的金纳米星溶液10～20 mL，然后加入浓度为0.1～10.0 mg/mL的氨基化合物1～5mL，进行避光搅拌反应6～12 h，再10000 rpm高速离心30min，然后用超纯水复溶得到氨基化金纳米星溶液；所述的氨基化合物为NH₂‑PEG2000‑SH和PEI‑SH中的一种或者两种混合物；（2）制备具有靶向性的金纳米星：分别称取叶酸15～20mg、N，N'‑二环己基碳酰亚胺10～15mg、N‑羟基琥珀酰亚胺7.5～10.5mg，然后依次加入2.5～5.0 mL反应溶液中，混匀溶解，再进行活化羧基，即在40～50℃、300～720r/min下避光磁力搅拌反应8～24h，然后将所得溶液10000 rpm高速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水复溶，加入步骤（1）制备的氨基化金纳米星溶液中进行酰化反应，室温避光搅拌反应12～24h，再10000 rpm高速离心30min，去除游离的小分子，得到末端含有氨基的叶酸靶向金纳米星溶液；所述的反应溶液是二甲基亚砜、磷酸盐缓冲液和丙酮中的一种；（3）制备具有近红外荧光成像和靶向性的金纳米星溶液：取0.01～2 mg荧光探针溶解于0.01～1 mL的反应溶剂中，加入步骤（2）制备的叶酸靶向金纳米星溶液中进行酰胺反应，室温避光搅拌反应12～24h，再10000rpm超速离心30min得沉淀，沉淀用超纯水0.01～1mL复溶，得到以金纳米星为载体具有靶向性和近红外荧光成像的抗肿瘤药物传递系统；所述的荧光探针是吲哚‑5‑菁、吲哚‑5.5‑菁和吲哚‑5.5‑菁‑N‑羟基琥珀酰亚胺中的一种；所述的反应溶剂是二甲基亚砜、磷酸盐缓冲液和丙酮中的一种；（4）制备负载阿霉素的金纳米星溶液：将步骤（3）制备的具有近红外荧光成像的靶向金纳米星溶液经干燥得粉末，将粉末和阿霉素以质量比1:1.5～3.0依次加到10～40 mL的反应溶剂中，在氮气保护下，超声溶解，在18～25℃下300～720r/min避光搅拌反应24～48h，得混合溶液，再将得到的混合溶液以10000rpm超速离心30min，得沉淀，沉淀用超纯水复溶，干燥即得光热和光动联合抗肿瘤的以叶酸介导的金纳米星为载体的药物传递系统；所述的干燥为冷冻干燥、真空干燥和烘干中的一种。