一种通过小分子化合物免疫共沉淀分离目标蛋白的方法

摘要

一种通过小分子化合物免疫共沉淀分离目标蛋白的方法，是将小分子物质与多肽分子耦连，然后免疫动物制备完全抗体。小分子物质作为半抗原结合到大分子载体上以后，可以形成新的表位，半抗原在表位中是关键性的基团。最后利用免疫反应将细胞内该小分子物质及与之相互结合的蛋白模型作为一个复合体沉淀下来，并从中筛选目标蛋白。本发明的方法具有目的明确，周期短，针对性强等优点。

主权项

一种通过小分子化合物免疫共沉淀分离目标蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，将小分子物质与多肽片段相耦连，制备半抗原载体系统；步骤二，将步骤一得到的半抗原载体系统免疫动物，提取、分离单克隆抗体；步骤三，将步骤二得到的抗体固定到磁珠上；步骤四，在非变性条件下裂解生物细胞，并加入防止蛋白降解的缓冲液，得到含有目标蛋白与小分子物质的溶液；步骤五，将步骤三得到的磁珠加入到步骤四得到的溶液中进行反应；步骤六，离心收集磁珠、以及磁珠上的“小分子物质‑蛋白”复合体，并进行质谱分析鉴定。