一种测定等离子体杀菌后悬浮液中蛋白质含量的方法

摘要

本发明公开一种测定等离子体杀菌后悬浮液中蛋白质含量的方法，首先配制五种试剂；接着完成牛血清白蛋白标准曲线的制定；然后完成待测液中蛋白质泄露含量的测定。本方明方法灵敏度非常高，最低可以测定1-5μg的蛋白质，能够反映出等离子体的杀菌效果以及细菌破裂程度。

主权项

一种测定等离子体杀菌后悬浮液中蛋白质含量的方法，其特征在于该方法的步骤如下：(1)、配制A、B、C、D、E五种试剂；A：143mM NaOH与270mM Na₂CO₃B：57mM CuSO₄C：124mM Na₂‑TartatD：A，B，C分别按照98∶1∶1混合E：Folin‑Cioucalteu试剂(2)牛血清白蛋白标准曲线的制定，精确称取的0.0100g结晶牛血清蛋白倒入烧杯中，加蒸馏水溶解后转到100ml容量瓶中定容得到；然后取编号为1‑6的试管6只，配置不同浓度的蛋白质标准含量溶液，实验中取每种样品3ml至干净的试管中，然后加试剂D 4.2ml，使用漩涡振荡器混合10s后室温下放置10min，然后在所有试管中均加入试剂E 0.6ml，立即混合均匀；计时45min以后，将1号试管作为不含蛋白质的对照组，使用分光光度计在750nm波长下测定所有样品的吸光度结果并记录；然后根据所得结果就能得到蛋白质含量的标准曲线，以牛血清白蛋白含量为横坐标，以吸光度值为纵坐标绘制出标准曲线；(3)待测液中蛋白质泄露含量的测定，等离子体杀菌后，将经等离子体处理后的样品以及未经过处理的对照组细菌溶液，所得悬浮菌液离心处理；然后每个样品取上清液3ml加入到干净试管中，按照上述方法测定每个样品的吸光度值；根据样品所得的吸光度，代入到标准曲线中计算出相对应的蛋白质含量。