一种核桃活性多肽提取物的制备方法及应用

摘要

本发明属于中药提取物的制备技术领域，具体公开了一种核桃活性多肽提取物的制备方法及应用。本发明制备方法的具体步骤包括：去皮核桃仁用碱溶酸沉法提取、离心、冷冻干燥后获得核桃蛋白冻干粉，依次加入中性蛋白酶、碱性蛋白酶酶解，离心取上清液，稀释后用凝胶层析分离，收集分子量3000-1000D的组分，冷冻干燥即得核桃活性多肽冻干粉。本发明采用复合酶酶解和凝胶色谱方法制备核桃活性多肽，具有条件温和、工艺简单、安全性高、绿色环保等优点；所制备的核桃活性多肽具有明显的口服降糖、降脂作用，可以用于制备糖尿病、高血脂的预防和治疗药物或保健食品及食品。

主权项

一种核桃活性多肽提取物的制备方法，步骤如下：（1）取核桃仁，加0.4‑0.8w/w% NaOH溶液浸泡20‑40分钟，取出核桃仁，去皮，粉碎成核桃仁粗粉；（2）向步骤（1）所得核桃仁粗粉中加入4‑8倍重量的0.4‑0.8w/w% NaOH溶液浸泡过夜，冷冻离心，收集中间水层，然后用0.1 mol/L HCl调节pH至4.0‑4.5，冷冻离心，收集沉淀，冷冻干燥，即得核桃蛋白冻干粉；（3）将步骤（2）所得核桃蛋白冻干粉用蒸馏水稀释至相当于含蛋白质2 g/100 mL的溶液，按酶底比1:（4‑11）加入中性蛋白酶，用0.1 mol/L HCl调节pH至7.0，在48℃下酶解0.5‑1.5小时，灭酶，冷却至室温；步骤（3）中所述酶底比为中性蛋白酶与核桃蛋白冻干粉中所含蛋白质的质量比；所述中性蛋白酶的活力为60000 u/g；（4）向步骤（3）所得溶液中按酶底比1:（4‑8）加入碱性蛋白酶，用0.1 mol/L NaOH调节pH至9.0，在55℃下酶解1‑3小时，灭酶，冷却至室温，冷冻离心，收集上清液；步骤（4）所述酶底比为碱性蛋白酶与步骤（2）所得核桃蛋白冻干粉中所含蛋白质的质量比；所述碱性蛋白酶的活力为60000 u/g；（5）将步骤（4）收集的上清液用蒸馏水稀释至为含多肽3‑7 mg/mL的溶液，用葡聚糖凝胶层析分离，收集分子量3000‑1000 D的组分，冷冻干燥，即得到核桃活性多肽提取物冻干粉。