从小球藻中提取叶绿素铜钠盐的方法

摘要

本发明涉及一种从小球藻中提取叶绿素铜钠盐的方法，该方法采用将小球藻菌种经活化、扩大培养，得到的小球藻液体经浸提，得到的小球藻固体，经超声波萃取破细胞壁，皂化后，用蒸馏水、石油醚、乙醇溶液连续洗涤，以除去未被皂化的叶绿素和叶黄素等其他色素杂质，浓缩，加入CuSO₄溶液铜化叶绿素，用少量水溶解后，加入NaOH-乙醇溶液,沉淀生成，控制溶液pH11～12；经抽滤，干燥，得到叶绿素铜钠盐。该方法为藻类植物的叶绿素测量、微藻中油脂的提取提供实验依据，为叶绿素盐的工业化生产提供试验数据。

主权项

一种从小球藻中提取叶绿素铜钠盐的方法，其特征在于，有以下步骤：1）取小球藻菌种，接种于SE固体培养基上活化，用SE液体培养基扩大培养，浓度为10⁷ 个/mL，得到小球藻液体；2）取步骤1）所述的小球藻液200mL，离心，所述离心的时间为5min ，离心的速度为3000r/min，用50‑65%乙醇作浸提剂，得到小球藻固体，小球藻固体与乙醇的固液比g/mL为1：10，超声波萃取破细胞壁，65℃下，用5%的NaOH溶液调至小球藻破碎液pH为11～12，用5%NaOH皂化30‑50 min，溶液蒸发浓缩；3）将步骤2）所得到的浓缩液用10mL蒸馏水、10mL石油醚、10mL 50%的乙醇溶液连续洗涤；4）用盐酸调节步骤3）所得溶液的pH为2～3，然后加入2mL质量分数为20%的CuSO₄ 溶液铜化叶绿素，60℃铜化40min^.，用少量蒸馏水溶解后，加入5mL质量分数为2% 的NaOH‑乙醇溶液；再用1mol/mL的NaOH溶液溶液调节混合液的pH为11～12；抽滤，干燥，得到叶绿素铜钠盐。