一种DNA文库及构建转录激活子样效应因子核酸酶质粒的方法

摘要

本发明公开了一种DNA文库及构建转录激活子样效应因子核酸酶质粒的方法，一种Tale连接单元库包括16组×n个双碱基识别模块和4组×m个单碱基识别模块，每个双碱基识别模块或单碱基识别模块两末端均有经二类限制性内切酶酶切形成第一粘性末端和第二粘性末端；DNA库包括与Tale连接单元库的连接单元数量相同的质粒，每个质粒包含一个碱基序列互异的连接单元，连接单元两末端与原始载体连接处有Bsa I酶切位点。采用本发明的DNA库用于构建转录激活子样效应因子核酸酶质粒，识别模块的酶切和连接能在一个反应中进行，可实现一步将12-19个识别模块连接起来，速度快，效率高，操作简单，材料易于保存，成本低。

主权项

一种转录激活子样效应因子连接单元库，其特征在于，包括16组×n个双碱基识别模块和4组×m个单碱基识别模块，每个双碱基识别模块或单碱基识别模块两末端均有经二类限制性内切酶酶切形成第一粘性末端和第二粘性末端，n表示每组双碱基识别模块的数量，m表示每组单碱基识别模块的数量；m、n为不为零的自然数，且m≤n；在同一组双碱基识别模块中，第i个双碱基识别模块的第二粘性末端与第i+1个双碱基识别模块的第一粘性末端互补；两组双碱基识别模块的粘性末端碱基序列一一对应相同，1≤i≤n‑1；在同一组单碱基识别模块中，第j个单碱基识别模块的第二粘性末端与第j+1个单碱基识别模块的第一粘性末端互补；一组单碱基识别模块的全部单碱基识别模块的粘性末端碱基序列与一组双碱基识别模块的部分或全部双碱基识别模块的粘性末端碱基序列一一对应相同，两组单碱基识别模块的粘性末端碱基序列一一对应相同，1≤j≤m‑1。