发明名称 |
一种快速测定山羊乳腺上皮细胞脂肪酸成分的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种快速测定山羊乳腺上皮细胞脂肪酸成分的方法,步骤包括:利用细胞刮铲收集细胞;应用超声波破碎细胞并利用硫酸/甲醇溶液进行脂肪酸甲酯化;利用HCl/正己烷溶液进行萃取抽提;利用无水Na<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>进行脂肪酸样品的干燥处理并用GC-MS进行脂肪酸成分测定。本发明的方法较传统的脂质提取方法,具有简单,快速,准确的优点,且适合于批量处理。 |
申请公布号 |
CN104807936A |
申请公布日期 |
2015.07.29 |
申请号 |
CN201510224053.6 |
申请日期 |
2015.05.05 |
申请人 |
西北农林科技大学 |
发明人 |
罗军;朱江江;孙雨婷;石恒波;李君;王伟 |
分类号 |
G01N30/88(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I |
主分类号 |
G01N30/88(2006.01)I |
代理机构 |
北京国智京通知识产权代理有限公司 11501 |
代理人 |
张瑜 |
主权项 |
一种快速测定山羊乳腺上皮细胞脂肪酸成分的方法,其特征在于:包括以下步骤:A1:收集细胞待细胞培养皿中细胞密度为90%以上时弃去细胞培养液,用PBS缓冲液清洗细胞,然后向所述细胞培养皿中添加一定量的硫酸/甲醇溶液,然后用细胞刮铲将细胞完全转移至预先加入一定量的硫酸/甲醇溶液的微量玻璃反应瓶中;所述细胞指山羊乳腺上皮细胞;A2:甲酯化处理将所述微量玻璃反应瓶盖拧紧密封,然后进行超声处理,超声处理后于水浴中放置一定时间,然后于室温下自然冷却;A3:脂肪酸抽提待冷却至室温后向所述微量玻璃反应瓶中加入1.5mL~2.5mL0.1M的HCl水溶液,并使用硅化枪头向微量玻璃反应瓶中加入800μL~1.5mL正己烷,然后涡旋震荡30s~1min震荡后离心;A4:成分测定使用硅化枪头取离心所得上清液并加入至装有无水Na<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>的2mL硅化离心管中,然后震荡30s~1min后静置5~7min,静置后离心,吸取离心所得上清液并加入至玻璃进样瓶中用于GC‑MS分析。 |
地址 |
712100 陕西省咸阳市杨凌示范区邰城路3号 |