摘要 |
La presente proporciona métodos, cultivos celulares y medios de diferenciación para promover la diferenciación de células madre pluripotentes a células endocrinas pancreáticas que expresan los marcadores PDX1, NKX6.1, y HB9 mediante el cultivo en un recipiente de cultivo en la interfase aire-líquido. Se proporciona, además, la maduración in vivo de células cultivadas en la interfase aire-líquido. Reivindicación 1: Un método para producir células que expresan marcadores característicos de las células endocrinas pancreáticas a partir de células madre pluripotentes; el método comprende las etapas de: a) cultivar células madre pluripotentes; b) diferenciar las células madre pluripotentes en células que expresan los marcadores característicos de las células precursoras del intestino proximal pancreático; y c) diferenciar las células que expresan los marcadores característicos de células precursoras del intestino proximal pancreático en células que expresan marcadores característicos de las células endocrinas pancreáticas mediante el tratamiento con por lo menos un medio complementado con un inhibidor de ALK5, o una hormona tiroidea seleccionada de triyodotironina, tiroxina, análogos de triyodotironina, análogos de tiroxina y mezclas de estos, o ambos el inhibidor de ALK5 y la hormona tiroidea, y cultivar en la interfase aire-líquido. |