一种具有高精确性和高重复性的药物筛选方法

摘要

本发明提供了一种具有高精确性和高重复性的药物筛选方法，该方法包括如下步骤：1）制备图案化纤维电纺接收板，利用光刻蚀技术和直流磁控溅射技术，制备具有图案化金属银层的接收板；2）制备图案化电纺纤维，利用步骤1）所得物进行静电纺丝；3）制备PDMS腔体；4）将步骤2）和步骤3）所得物用等离子处理进行连接；5）将原代小鼠心肌细胞接种于步骤4）所得物中的图案化电纺纤维上，利用注射泵将培养基泵入步骤4）所得物的腔体，再将药物泵入,于药物泵入后20天内记录心肌细胞跳动频率，得到EC₅₀值，根据EC₅₀值对药物进行刷选。本发明实现了细胞在较小腔体内的正常生长的同时还具备筛选药物和重复使用的效果，具有高精确度和高重复性。

主权项

一种具有高精确性和高重复性的药物筛选方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1）制备图案化纤维电纺接收板：先在绝缘玻璃片上涂覆正性感光胶，再覆盖一层光掩模，利用光刻机进行刻蚀；再通过直流磁控技术在刻蚀后的玻璃片上沉积一层金属银，所沉积的金属银的形状为折线状，折线宽度为 20 μm‑100 μm；最后清洗掉剩余的正性感光胶；2）制备图案化电纺纤维：将医用高分子聚合物用有机溶剂溶解，利用步骤1）所得物作为电纺接收板，通过静电纺丝技术制备折线状图案化电纺纤维；控制所得纤维的直径为200‑400 nm；    所述医用高分子聚合物包括聚乳酸、聚己内酯、聚氨酯、聚丙烯腈中的一种，所述有机溶剂包括丙酮、二甲基甲酰胺中的至少一种；3）将负性环氧树脂型近紫外线光刻胶SU‑8放置在硅片上，利用光刻蚀技术，去掉其余的SU‑8，保留宽为40‑300μm、高为30‑100μm的SU‑8长方体作为模具；将熔融的PDMS置于所得模具上，待PDMS冷却后，去除模具，得到PDMS腔体；4）将步骤2）和步骤3）所得物在O₂ 或N₂的氛围下，用等离子体处理30秒，使得步骤2）和步骤3）所得物紧密连接；5）将3×10⁶‑8×10⁶个原代小鼠心肌细胞接种于步骤4）所得物中的图案化电纺纤维上，利用注射泵将培养基泵入步骤4）所得物的腔体，流速为0.1‑0.3 ml/h；再将0.1‑1000 μM的药物泵入,于药物泵入后20天内记录心肌细胞跳动频率，得到EC₅₀值，根据EC₅₀值对药物进行筛选；所述药物包括奎尼丁、红霉素、甲磺胺心定、氟哌啶醇中的一种。