芸薹属栽培种细胞质的分子检测方法

摘要

本发明公开了芸薹属几个栽培种细胞质的分子检测方法，用其线粒体和叶绿体目标基因的特异性引物进行PCR扩增，将PCR的电泳检测结果进行数字化处理，用遗传分析软件进行分析，根据植物材料间的遗传距离聚类结果，区分来自不同栽培种的细胞质；本发明能快速、有效地鉴别芸薹属栽培种细胞质，为品种选育和材料创新提供帮助。

主权项

芸薹属栽培种细胞质的分子检测方法，其特征在于：对其线粒体和叶绿体DNA为模板，用以下13对特异引物对ccmp2、trnL‑F、rpl16、trnE‑trnT、ACP2、ACP4、ACP35、ACP38、ACP47、ACP29、PsbB‑PsbT、BnTR1、BnTR4进行扩增，其中：第一对引物序列为：正向引物 5’ ‑GATCCCGGACGTAATCCTG‑3’反向引物 5’ ‑ATCGTACCGAGGGTTCGAAT‑3’第二对引物序列为：正向引物 5’ ‑TCAATTGCACATTCTAGAATTCTAAG‑3’反向引物 5’ ‑CAATTCAATATGGTTATATATTAGAG‑3’第三对引物序列为：正向引物 5’ ‑GGTTCCGTCGTTCCCATCGC‑3’反向引物 5’ ‑CATAATAATTAGATAAATCTGTTCC‑3’第四对引物序列为：正向引物 5’ ‑AATGGTATGACTAGCTTATAAGG‑3’反向引物 5’ ‑CTTAACAATGAGATGAGGCAATC‑3’第五对引物序列为：正向引物 5’ ‑GAAAAATGCAAGCACGGTTT‑3’反向引物 5’ ‑TACGATCCGTAGTGGGTTGC‑3’第六对引物序列为：正向引物 5’ ‑TACCCGTATTAGGCACTA‑3’反向引物 5’ ‑TTTGTAAGACCACGACTG‑3’第七对引物序列为：正向引物 5’ ‑ATTGGCTTACTTCTTGCG‑3’反向引物 5’ ‑GGTTTCCGGGATGTTATT‑3’第八对引物序列为：正向引物 5’ ‑GGTTCGTTAGCAGGTTTA‑3’反向引物 5’ ‑GTTCCCTAGCAACACTTT‑3’第九对引物序列为：正向引物 5’ ‑TGTACTTATGGGAAAGCG‑3’反向引物 5’ ‑CTGGGTTCTTCTACTTCATT‑3’第十对引物序列为：正向引物 5’ ‑GGCCATAGGCTGGAAAGTCT‑3’反向引物 5’ ‑GTTTATGCATGGCGAAAAGG‑3’第十一对引物序列为：正向引物 5’ ‑CCAAAAACTTGGAGATCCAACTAC‑3’反向引物 5’ ‑TTCCATAGATTCGATCGTGGTTTA‑3’第十二对引物序列为：正向引物 5’ ‑CCGTTAGGGGTATTTAGTAACTCG‑3’反向引物 5’ ‑ACATAATGGCAATGTATCGGACTG‑3’第十三对引物序列为：正向引物 5’ ‑GAAGTCCGAGGACCTTTAGTACC‑3’反向引物 5’ ‑AGTAAGTTGTAGGTAGGGGCTTCAT‑3’。