一种量子点标记免疫层析试纸的制备方法

摘要

本发明涉及医学免疫检测方法，特别是涉及使用量子点标记免疫层析试纸，以免疫学的方法检测腮腺炎病毒的方法。一种量子点标记免疫层析试纸，在塑料板上从下到上依次粘贴有玻璃纤维素膜A、量子点标记腮腺炎病毒IgG单克隆抗体的玻璃纤维素膜B、硝酸纤维素膜、吸水纸；其中，所述硝酸纤维素膜一端有腮腺炎病毒多克隆抗体和兔抗鼠二抗，以此形成检测带T和质控带C；所述量子点标记的腮腺炎病毒IgG单克隆抗体位于玻璃纤维素膜B的一端，与检测带T和质控带C相对应，并且量子点标记的腮腺炎病毒IgG单克隆抗体位于进样点一端。该方法的检测灵敏度比常用的检测方法的灵敏度高1000倍左右。

主权项

一种量子点标记免疫层析试纸的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)量子点与腮腺炎病毒IgG单克隆抗体的偶联：取0.01M的PBS缓冲液100～200μL与5～20μL表面连有羧基的CdTe/ZnSe核壳量子点；选取偶联试剂；加入腮腺炎病毒IgG单克隆抗体150～200μL；摇床反应1～4小时；层析柱过滤，离心纯化；用1％～5％的牛血清白蛋白封闭；4℃保存；(2)试纸的制备：用0.05～0.15M的PBS缓冲液稀释腮腺炎病毒多克隆及兔抗鼠二抗，将0.5g/L腮腺炎病毒多克隆和1.0g/L兔抗鼠二抗喷在硝酸纤维素膜一端，形成检测带T和质控带C，T带和C带间隔5mm，室温晾干，将硝酸纤维素膜放入PBS缓冲液中，37℃封闭待用，或者干燥后4℃保存；将量子点标记的腮腺炎病毒IgG单克隆抗体均匀喷覆于玻璃纤维膜B一端，与检测带T和质控带C相对应，室温干燥，4℃保存；在粘性PVC底板上依次粘帖玻璃纤维素膜A、量子点标记腮腺炎病毒IgG单克隆抗体的玻璃纤维素膜B、硝酸纤维素膜、吸水纸；用试纸切刀切割成试纸，干燥后密封保存。