嵌合抗原受体双阴性T细胞的构建方法

摘要

本发明公开了一种嵌合抗原受体双阴性T细胞的构建方法，根据CD3⁺/CD4^－/CD8^－双阴性T细胞的特性，体外分选出纯化的CD3⁺/CD4^－/CD8^－双阴性T细胞，利用多种细胞因子信号通路和TCR信号通路协同作用的原理，筛选出适合于双阴性T细胞激活和病毒转染的体外培养方案，能够快速、可控的激活双阴性T细胞，并将特定的嵌合抗原受体用慢病毒转染技术高效率表达于双阴性T细胞上，制备出CAR－DN－T细胞，使其能特异性的识别嵌合抗原受体对应的肿瘤细胞，促进CAR－DN－T细胞的进一步活化和增殖，并快速杀伤肿瘤细胞。本发明制备的CAR－DN－T细胞，可来源于同源异体的其他健康捐赠者，因此该细胞的制备摆脱了病人当下疾病状况的限制，可提前大规模制备，并随时根据临床诊断结果对病人进行低剂量、多次回输治疗。

主权项

一种嵌合抗原受体双阴性T细胞的构建方法，其特征在于：根据CD3⁺/CD4^－/CD8^－双阴性T细胞的特性，体外分选出纯化的CD3⁺/CD4^－/CD8^－双阴性T细胞，利用多种细胞因子信号通路和TCR信号通路协同作用的原理，筛选出适合于双阴性T细胞激活和病毒转染的体外培养方案，能够快速、可控的激活双阴性T细胞，并将特定的嵌合抗原受体用慢病毒转染技术高效率表达于双阴性T细胞上，制备出CAR－DN－T细胞，使其能特异性的识别嵌合抗原受体对应的肿瘤细胞，促进CAR－DN－T细胞的进一步活化和增殖，并快速杀伤肿瘤细胞。