一种快速检测纺织品中大肠菌群的方法

摘要

本发明涉及纺织品微生物检测领域，特别是一种快速检测纺织品中大肠菌群的法包括以下步骤：步骤一：检样采集；步骤二：样液制备；步骤三：样液稀释，过滤；步骤四：菌群培养检测；步骤五：结果计算；步骤六：结果报告，本发明采用生理盐水洗脱纺织品中的微生物，采用孔径为0.45μm微孔薄膜快速抽提，此种滤膜能滤过大量液体，并将样液中所含的细菌截留在滤膜上，然后将滤膜贴在相应微生物测试片上，经过培养后，大肠菌群在测试片上长出具有相应特征性的菌落，直接计数菌落数，计算出每平方厘米中样品所含大肠菌群数，本发明检测法考虑了各种样品面积的大小、及厚度，采集的样品更具代表性，使检测结果更准确，对样品的真实情况反映更确切。

主权项

一种快速检测纺织品中大肠菌群的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一：检样采集在送检的纺织品四周和中间均匀布控5个～10个采样点，用灭菌不锈钢直尺测量，根据纺织品面积大小，每件纺织品共采集5份～10份检样；采样面积可按送检的纺织品面积大小扩大或缩小；步骤二：样液制备将采集好的5份～10份检样放入盛有200mL灭菌生理盐水的全滤网无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，得到一个生理盐水样液，制成样液作为原液，如果被检样品大量吸水而导致不能吸出足够样液时，灭菌生理盐水量可按每次100mL递增，直至能抽提有足够100mL～120mL的测试样液；每个样品30min内抽提检测完毕；步骤三：样液稀释，过滤应根据样品污染情况确定样液的稀释倍数，以滤过一张无菌滤膜后能产生小于100个菌落为宜，每张滤膜过滤100mL样品；如果样品污染严重，可将样液原液稀释10倍，取100mL稀释液过滤；步骤四：菌群培养检测取出大肠菌群测试片，在室温下放置10min，揭开覆盖薄膜，吸取1mL无菌水或生理盐水于测试片培养基上，盖上覆盖薄膜，常温放置1h，使测试片培养基完全水化，用无齿灭菌镊子夹取孔径为0.45μm微孔灭菌滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴放在已灭菌的滤床上，固定好滤器，将制好的样液注入滤器中，打开滤器阀门，在负0.5大气压下抽滤，样液滤完后，再抽气约5s，关上滤器阀门，取下滤器，用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分，移放在大肠菌群测试片上，滤膜截留细菌面向上，滤膜应与测试片完全贴紧，两者间不留有气泡，然后将测试片放入36℃±1℃培养箱内培养24h±2h，大肠菌群在测试片上培养出的菌落具有以下特征：红色小菌落，周围有气泡；步骤五：结果计算直接计数微生物测试片上产气泡的菌落，以每平方厘米样品中的大肠菌群个数报告结果：按式(1)计算，步骤六：结果报告如果样品原液测试片上无菌落长出，结果报告为0 CFU/cm²；如果10倍样品稀释液测试片上无菌落长出，结果报告为＜10 CFU/cm²；其它选择测试片上菌落数小于100 CFU的测试片计数，按式(1)计算报告。