红豆杉紫杉醇活性提取物的提取方法

摘要

一种红豆杉紫杉醇活性提取物的提取方法，先将红豆杉枝叶粉碎至20-50目，加入3-5倍量的石油醚与正己烷（2-3：1）的混合物，于0-5℃下放置10-12小时，过滤得到滤渣；然后进行浸提，最后进行硅胶分离。本发明采用工艺，采用低温浸提，不同浓度梯度甲醇浸提，极大地保护了紫杉醇，使其在分离过程中不发生转化，紫杉醇作为一种生物大分子物质，受温度、有机溶剂、酸、碱等环境条件的影响，易降解或异构生成其它紫杉烷类物质。如紫杉醇在强酸性或弱碱性环境条件下会降解为巴卡亭III或发生表位异构生成7-表紫杉醇；温度较高时也会发生降解反应，生成相应的小分子物质。本发明工艺大大提高了紫杉醇的得率。产品纯度高。

主权项

一种红豆杉紫杉醇活性提取物的提取方法，其特征是，包括以下工艺步骤：（1）、将红豆杉枝叶粉碎至20‑50目，加入3‑5倍量的石油醚与正己烷的混合物，于0‑5℃下放置10‑12小时，过滤得到滤渣；其中，石油醚与正己烷的体积比为2‑3：1；（2）、滤渣置于提取釜中，加入6‑10 倍红豆杉枝叶体积的85‑95%的甲醇进行提取，提取液温度为‑10‑‑5℃，提取时间为4‑5小时，过滤得到滤液，滤液pH调为中性；滤渣加入3‑5倍量的55‑65%的甲醇进行提取，提取液温度为‑10‑‑5℃，提取时间为4‑5小时，过滤得到滤液，滤液pH调为中性；滤渣再加入3‑5倍量的40‑45%的甲醇进行提取，提取液温度为‑10‑‑5℃，提取时间为10‑15小时，过滤得到滤液；（3）、合并每次过滤的滤液得到粗提取液；（4）、将粗提取液进行0‑5℃下低温减压浓缩得到粗浸膏；将粗浸膏溶于35‑50℃的热水中，粗浸膏与热水的体积比为1∶2‑3；（5）、向热水中加入乙酸乙酯进行萃取，浸膏与乙酸乙酯的体积比为1∶2‑3，萃取多次，合并乙酸乙酯萃取液；将乙酸乙酯萃取液减压浓缩得到含有紫杉醇的乙酸乙酯浸膏；（6）、将含有紫杉醇的乙酸乙酯浸膏同硅胶混合制备干样，填充干样到硅胶200‑300目的色谱柱上端，用2：1的乙酸乙酯‑甲醇混合液淋洗，淋洗液流出色谱柱后，分段收集馏分，按段将紫杉醇含量为10‑30%之间的淋洗液馏分集中起来，经浓缩、干燥，得到中间产品；（7）、将紫杉醇含量低于10%的淋洗液馏分，集中起来重复步骤（6）；（8）、将步骤（6）得到的中间产品用乙腈溶解，用高压液相色谱分离，色谱柱为C18硅胶填料，流动相为乙腈和水，而后将分离后含紫杉醇的流动相进行蒸发，干燥，得到高纯度紫杉醇。