发明名称 采用Taqman探针法鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn)的方法及试剂盒
摘要 本发明“采用Taqman探针法鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn)的方法及试剂盒”,涉及植物病害检测技术。包括如下步骤:(1)获得TCK阳性质粒标准品的实时定量标准曲线,其中Ct值为纵坐标,起始模板拷贝数为横坐标;(2)提取待测样品的DNA;(3)以所述待测样品的DNA为模板进行实时荧光定量PCR反应,(4)根据所述实时荧光定量PCR反应获得的Ct值以及所述实时定量标准曲线得到所述待测样品中TCK的拷贝数;其特征在于:所述实时荧光定量PCR反应采用的引物如下:上游引物ACGACCGACTTTCCGAGAGC下游引物GTGTGGGACGAAGGCATCAA;Taqman探针FAM 5'-ACGACTTGCGGTCCCTCCACA-3'TAMAR,还提供了基于该方法的试剂盒。
申请公布号 CN104774920A 申请公布日期 2015.07.15
申请号 CN201510018516.3 申请日期 2015.01.14
申请人 中国农业科学院植物保护研究所 发明人 高利;陈万权;蔚慧欣;刘太国;刘博
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 代理人 吴泳历
主权项 用于鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn)的Taqman探针法,包括如下步骤:(1)获得TCK阳性质粒标准品的实时定量标准曲线,其中Ct值为纵坐标,起始模板拷贝数为横坐标;(2)提取待测样品的DNA;(3)以所述待测样品的DNA为模板进行实时定量PCR反应,(4)根据所述实时定量PCR反应获得的Ct值以及所述实时定量标准曲线得到所述待测样品中TCK的拷贝数;其特征在于:所述实时定量PCR反应采用的引物及探针如下:上游引物ACGACCGACTTTCCGAGAGC,下游引物GTGTGGGACGAAGGCATCAA;Taqman探针FAM 5'‑ACGACTTGCGGTCCCTCCACA‑3'TAMAR。
地址 100193 北京市海淀区圆明园西路2号
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