发明名称 |
采用Taqman探针法鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn)的方法及试剂盒 |
摘要 |
本发明“采用Taqman探针法鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn)的方法及试剂盒”,涉及植物病害检测技术。包括如下步骤:(1)获得TCK阳性质粒标准品的实时定量标准曲线,其中Ct值为纵坐标,起始模板拷贝数为横坐标;(2)提取待测样品的DNA;(3)以所述待测样品的DNA为模板进行实时荧光定量PCR反应,(4)根据所述实时荧光定量PCR反应获得的Ct值以及所述实时定量标准曲线得到所述待测样品中TCK的拷贝数;其特征在于:所述实时荧光定量PCR反应采用的引物如下:上游引物ACGACCGACTTTCCGAGAGC下游引物GTGTGGGACGAAGGCATCAA;Taqman探针FAM 5'-ACGACTTGCGGTCCCTCCACA-3'TAMAR,还提供了基于该方法的试剂盒。 |
申请公布号 |
CN104774920A |
申请公布日期 |
2015.07.15 |
申请号 |
CN201510018516.3 |
申请日期 |
2015.01.14 |
申请人 |
中国农业科学院植物保护研究所 |
发明人 |
高利;陈万权;蔚慧欣;刘太国;刘博 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 |
代理人 |
吴泳历 |
主权项 |
用于鉴定小麦黑穗菌(Tilletia controversa Kühn)的Taqman探针法,包括如下步骤:(1)获得TCK阳性质粒标准品的实时定量标准曲线,其中Ct值为纵坐标,起始模板拷贝数为横坐标;(2)提取待测样品的DNA;(3)以所述待测样品的DNA为模板进行实时定量PCR反应,(4)根据所述实时定量PCR反应获得的Ct值以及所述实时定量标准曲线得到所述待测样品中TCK的拷贝数;其特征在于:所述实时定量PCR反应采用的引物及探针如下:上游引物ACGACCGACTTTCCGAGAGC,下游引物GTGTGGGACGAAGGCATCAA;Taqman探针FAM 5'‑ACGACTTGCGGTCCCTCCACA‑3'TAMAR。 |
地址 |
100193 北京市海淀区圆明园西路2号 |