一种葡萄座腔菌的检测方法

摘要

本发明涉及一种葡萄座腔菌的检测方法，尤其是指葡萄座腔菌的三重实时荧光PCR检测方法，属于检验检疫技术领域。本发明设计了三组葡萄座腔菌特异性引物和探针，并对反应体系进行了优化，建立了三重实时荧光定量PCR检测方法，能够同时检测鉴定多种病原真菌以及确定复合侵染病原。本发明将纳米磁微粒运用于真菌核酸提取中，使得真菌核酸提取更加操作简单、高效，同时与实时荧光检测技术相结合，可用于田间病害发生监测及病原菌快速、高通量的检测鉴定。

主权项

一种三重荧光定量PCR的检测组合物，包括：B.stevensii引物Bst‑F:TCATCGAGAAGTTCGAGAAGGTAAG(SEQ ID No.1)B.stevensii引物Bst‑R：CAAGTGCGGCCAGTTTGC(SEQ ID No.2)B.stevensii探针Bst‑T：TGCGCTTATCTGCCGCCGTG(SEQ ID No.3)B.obtusa引物Bob‑F：TCATCGAGAAGTTCGAGAAGGTAAG(SEQ ID No.1)B.obtusa引物Bob‑R：CAAGTGCGGCCAGTTTGC(SEQ ID No.2)B.obtusa探针Bob‑T：ACAGCCCACCTTATCGCTCGGTGAG(SEQ ID No.4)B.dothidea引物Bod‑F：TCATCGAGAAGTTCGAGAAGGTAAG(SEQ ID No.1)B.dothidea引物Bod‑R：GGAGATTTTGCCGAAGACCA(SEQ ID No.5)B.dothidea探针Bod‑T：ACATTTTCTGTGCCTGCACGTGTGCTG(SEQ ID No.6)。