一种沉默DF-1细胞系中IFNAR2基因的方法

摘要

本发明公开了一种沉默DF-1细胞系中IFNAR2基因的方法。它首先根据IFNAR2基因，设计RNA干扰靶点序列的多个siRNA，进一步筛选出mRNA水平上敲低IFNAR2基因表达的siRNA；再构建含有IFNAR2 RNAi基因的慢病毒载体；通过上述慢病毒载体，将IFNAR2RNAi基因介导入DF-1细胞系，沉默IFNAR2基因的表达，提高禽流感病毒在DF-1细胞系中的增殖滴度。此方法可提高禽流感病毒在DF-1细胞系中的抗原量达5-10倍，大大降低疫苗生产成本，不仅能解决疫苗抗原量不足以及生产成本较高的问题，而且推动禽流感生物反应器细胞培养技术的研发进程。

主权项

一种沉默DF‑1细胞系中IFNAR2基因的方法，其特征是，(1)根据IFNAR2基因，设计RNA干扰靶点序列的多个siRNA，进一步筛选出mRNA水平上敲低IFNAR2基因表达的siRNA；(2)构建表达上述筛选的IFNAR2基因siRNA的慢病毒载体；(3)通过上述慢病毒载体，将IFNAR2基因siRNA导入DF‑1细胞系，沉默IFNAR2基因的表达，提高禽流感病毒在DF‑1细胞系中的增殖滴度。