一种水蛭素提取分离的工艺

摘要

本发明公开了一种水蛭素提取分离的工艺，将水蛭打碎匀浆之后的提取液经过陶瓷滤膜过滤，用蒸馏水进行陶瓷滤膜清洗；合并陶瓷滤膜过滤液和清洗液，经有机滤膜过滤，用蒸馏水进行有机滤膜清洗；将得到的有机滤膜过滤液和清洗液通过凝胶色谱柱洗脱，再通过高压液相层析仪检测洗脱液；将水蛭素色谱纯度达到80％以上的流分进行收集，将收集到的洗脱液再经纳滤膜浓缩，将浓缩液经过反相c18半制备柱进行纯化，收集目标峰值；进行冷冻干燥，得到冻干水蛭素纯品。本发明采用陶瓷滤膜和有机膜进行结合过滤分离的方式，水蛭匀浆液中的大部分杂质可以得到去除，提高了提取的效率，而且操作方便，避免了有机溶剂的使用，提取制备成本大大降低。

主权项

一种水蛭素提取分离的工艺，其特征在于包括以下步骤：步骤一：对水蛭提取液进行过滤：将水蛭打碎匀浆之后的提取液经过至少一次陶瓷滤膜过滤，收集过滤液，再用蒸馏水进行陶瓷滤膜清洗；合并陶瓷滤膜过滤液和清洗液，再经有机滤膜过滤，收集过滤液，再用蒸馏水进行有机滤膜清洗；步骤二：洗脱：将步骤一得到的有机滤膜过滤液和清洗液通过凝胶色谱柱洗脱，再通过高压液相层析仪检测洗脱液；步骤三：纯化：将水蛭素色谱纯度达到80％以上的流分进行收集，将收集到的洗脱液再经纳滤膜浓缩，得到纳滤浓缩液后，将浓缩液经过反相c18半制备柱进行纯化，收集目标峰值；步骤四：对步骤三得到的液体进行冷冻干燥，得到冻干水蛭素纯品。