针对互补作用质量性状基因的分子标记筛选方法

摘要

本发明公开了一种针对互补作用质量性状基因的分子标记筛选方法，包括如下步骤：构建3个初筛模板，进行亲本初筛引物；构建16个样品小群体，进行亲本间有差异引物的复筛，符合约定规律的引物作为疑似标记进入下一轮筛选；构建38个样品小群体，选取目的条带在此群体中符合约定规律的引物作为疑似标记进入下一轮筛选；构建24个样品小群体，保留在此群体中符合约定规律的标记；初步确定目标基因所在染色体，集中筛选预备标记；对另外互补的基因利用如上方法进行筛选；群体验证筛出的互补作用的基因的分子标记，定位并作出遗传图谱。本发明结合SSR等分子标记使用，使此类二或多对基因互补产生的质量性状的基因的分子标记筛选变得相对简单易行。

主权项

针对互补作用质量性状基因的分子标记筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、构建3个初筛模板，按照相应引物的退火温度做SSR‑PCR，然后把PCR产物做聚丙烯酰胺凝胶电泳，按照同一个引物的3个不同模板为一组，以不同引物不同组的先后顺序点样，然后分析每一组即相同引物的3个样品之间的带型差异，进而筛选出在两亲本间有差异的SSR引物，以便进一步筛选验证；S2、构建16个样品小群体，并以此为模板做SSR‑PCR，然后用PCR产物做聚丙烯酰胺凝胶电泳，分析同一引物对应的样本组内目的条带的差异，选取符合在此群体中约定规律的引物作为疑似标记进入下一轮筛选；S3、构建38个样品小群体，并以此为模板进行SSR‑PCR，然后用PCR产物做聚丙烯酰胺凝胶电泳，分析同一引物对应的样本组内目的条带的差异，选取符合在此群体中约定规律的引物作为疑似标记进入下一轮筛选；S4、构建24个样品小群体，并以此为模板进行SSR‑PCR，然后用PCR产物做聚丙烯酰胺凝胶电泳，分析同一引物对应的样本组内目的条带的差异，保留在21个隐性性状群体中，有不少于5个且小于15个隐性带型的引物，然后准备进一步用扩大了的显性性状群体验证；S5、初步确定目标基因所在染色体，集中筛选预备标记；S6、对另外互补的基因利用上述方法进行筛选；S7、群体筛出的互补作用的基因的分子标记，定位出基因并作出遗传图谱。