发明名称 一种提高SSR分子标记扩增和检测效率的方法
摘要 本发明提供一种提高SSR分子标记扩增和检测效率的方法,属于SSR分子标记检测应用领域。本发明通过改进传统的SSR分子标记的PCR扩增方法以及在聚丙烯酰胺电泳检测时采用六次点样方法,极大地缩短了SSR分子标记检测时间。本发明改进后的PCR扩增时间较传统的SSR分子标记PCR扩增时间缩短了37min;在聚丙烯酰胺电泳检测过程中通过六次点样技术,与传统的一次点样技术相比,将制胶凝胶时间,预电泳时间、电泳时间和染色缩短为传统时间的五分之一,并且能同时检测大量样本的基因型,降低了制备凝胶和染色试剂的成本。本发明方法可用于检测大量植物样本的基因型。
申请公布号 CN104762393A 申请公布日期 2015.07.08
申请号 CN201510167089.5 申请日期 2015.04.09
申请人 湖北文理学院 发明人 翟立红;腾峰;李知洪;张祖新
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京智为时代知识产权代理事务所(普通合伙) 11498 代理人 王加岭;杨静
主权项 一种提高SSR分子标记扩增和检测效率的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)基因组DNA的提取;(2)SSR分子标记的PCR扩增;所述PCR扩增包括2个不同的循环程序;(3)聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增产物,所述聚丙烯酰胺凝胶电泳检测采用六次点样法;所述六次点样法为同一个加样孔中分时段先后6次加入不同的PCR产物;(4)银染显色。
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