雨生红球藻的破壁方法

摘要

雨生红球藻的破壁方法，涉及一种淡水藻细胞壁的破碎方法。藻种平板培养；通过血球计数板对藻液计数，接种至装有一级种子BBM+V培养基的三角瓶中培养，待藻体长至对数生长期，得一级种子液；取一级种子液接种至装有二级种子BBM+V培养基的三角瓶中培养，每天手摇2次，以防藻粘壁，得二级种子液；在三角瓶中装入发酵培养基，按初始藻细胞密度为5×10⁴cells/ml的细胞密度接入二级种子液，放置于光照培养箱中培养，每天定期手动摇瓶2次，每组细胞做三个生物学重复；利用高压匀浆破碎法、高速珠磨法或手动研磨法对藻体进行破壁处理，取样用于类胡萝卜素释放量及细胞破碎率等参数的分析。

主权项

雨生红球藻的破壁方法，其特征在于包括以下步骤：1)藻种平板培养；2)通过血球计数板对低温保存的藻液进行计数，按初始藻细胞密度为5×10⁴cells/ml的细胞密度接种至装有一级种子BBM+V培养基的三角瓶中，放置于光照培养箱中培养，每天定期手动摇瓶2次，待藻体长至对数生长期7～10d，得一级种子液；3)取一级种子液接种至装有二级种子BBM+V培养基的三角瓶中培养，每天手摇2次，得二级种子液；4)在三角瓶中装入发酵培养基，按初始藻细胞密度为5×10⁴cells/ml的细胞密度接入二级种子液，放置于光照培养箱中培养，每天定期手动摇瓶2次，每组细胞做三个生物学重复；5)利用高压匀浆破碎法、高速珠磨法或手动研磨法对藻体进行破壁处理，取样用于类胡萝卜素释放量及细胞破碎率等参数的分析。