发明名称 |
用于RET融合基因检测的引物、探针及检测试剂盒 |
摘要 |
本发明公开了一种用于RET融合基因检测的引物、探针,包括RET融合突变特异性反转录引物及RET基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列;一种用于RET融合基因检测的检测试剂盒,包括mRNA反转录cDNA体系,所述的mRNA反转录cDNA体系用于所述的检测试剂盒的PCR反应;本发明采用了特异引物和探针技术,可以特异检测人类RET基因融合突变;建立了实时荧光PCR体系,可同时检测RET基因17种融合突变;灵敏度高,5-10拷贝的突变可以检出;操作简单,检测廉价,临床应用范围广;样本检测范围广,样本可以为新鲜病理组织,石蜡包埋组织或胸腔液;检测速度快,检测过程只需要90分钟即可完成。 |
申请公布号 |
CN104745719A |
申请公布日期 |
2015.07.01 |
申请号 |
CN201510209462.9 |
申请日期 |
2015.04.28 |
申请人 |
上海允英医疗科技有限公司 |
发明人 |
张道允;巩子英 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种用于RET融合基因检测的引物、探针,其特征在于:包括RET融合突变特异性反转录引物及RET基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列;所述的RET融合突变特异性反转录引物具体为:RET反转录1: TGAAGGAGAAGAGGACAGCG SEQ ID NO:01RET反转录2: CACCGGAAGAGGAGTAGCTGAC SEQ ID NO:02RET反转录3: CCAAATTCGCCTTCTCCTAGAG SEQ ID NO:03Actin反转录4: CAGGAGGAGCAATGATCTTG SEQ ID NO:04;所述的RET基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列包括KIF5B和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列、CCD1、CCD2、ERC和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列、GOLGA7F、NCOA8F、HOOK11F和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列、PCM29F、PRKAR7F、KTN29F和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列、TRIM24、TRIM33和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列、KIF5B‑24和RET‑11基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列及KIF5B‑15和RET‑11基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列;所述的KIF5B和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列具体为:KIF15F GAAATAGGAATTGCTGTGGGAAAT SEQ ID NO:05KIF16F TAGCAGCATGTCAGCTTCGTAT SEQ ID NO:06KIF22F CTCTTTGTTCAGGACCTGGCTAC SEQ ID NO:07KIF23F AATCTTGAACAGCTCACTAAAGTGC SEQ ID NO:08RET12R CCAAATTCGCCTTCTCCTAGAG SEQ ID NO:09Taqman Ret12 FAM‑5‑ ATCCAAAGTGGGAATTCC‑3‑BHQ‑MGB SEQ ID NO:10;所述的CCD1、CCD2、ERC和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列具体为:CCDC1F GCACTGCAGGAGGAGAACC SEQ ID NO:11CCDC2F TTCCTCACTAATGAGCTCTCCAG SEQ ID NO:12ERC11F TTGGAGCAGAAGAAGGAGGAG SEQ ID NO:13RET12R CCAAATTCGCCTTCTCCTAGAG SEQ ID NO:14Taqman Ret12 FAM‑5‑ ATCCAAAGTGGGAATTCC‑3‑BHQ‑MGB SEQ ID NO:15;所述的GOLGA7F、NCOA8F、HOOK11F和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列具体为:GOLGA7F GAAGCTGATGGGCCAGATACAT SEQ ID NO:16NCOA8F CAGGACTGGCTTACCCAAAAG SEQ ID NO:17HOOK11F AGTTAAGAAAGGCCAACGCAG SEQ ID NO:18RET12R CCAAATTCGCCTTCTCCTAGAG SEQ ID NO:19Taqman Ret12 FAM‑5‑ ATCCAAAGTGGGAATTCC‑3‑BHQ‑MGB SEQ ID NO:20;所述的PCM29F、PRKAR7F、KTN29F和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列具体为:PCM29F GACCGGCAAATTAAAGCAATTAT SEQ ID NO:21PRKAR7F AATGTGAAATTGTGGGGCATC SEQ ID NO:22KTN29F GCCATGCTAAAAGAGAGGGAG SEQ ID NO:23RET12R CCAAATTCGCCTTCTCCTAGAG SEQ ID NO:24Taqman Ret12 FAM‑5‑ATCCAAAGTGGGAATTCC‑3‑BHQ‑MGB SEQ ID NO:25;所述的TRIM24、TRIM33和RET‑12基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列具体为:TRIM24‑9F GCACCTGTGGGTTTACCAAAC SEQ ID NO:26TRIM33‑16F GTAAGAAGGGGAAAACTGCGC SEQ ID NO:27RET12R CCAAATTCGCCTTCTCCTAGAG SEQ ID NO:28Taqman Ret12 FAM‑5‑ATCCAAAGTGGGAATTCC‑3‑BHQ‑MGB SEQ ID NO:29;所述的KIF5B‑24和RET‑11基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列具体为:KIF24F TCGCATAAAGGAAGCAGTCAG SEQ ID NO:10K24R11R TGAAGGAGAAGAGGACAGCG SEQ ID NO:10TaqmanK24R11 FAM‑5‑AAGAGGGCATTCTGCAC‑3‑BHQ‑MGB SEQ ID NO:30;所述的KIF5B‑15和RET‑11基因融合突变检测特异性引物和探针核苷酸序列具体为:KIF15F GAAATAGGAATTGCTGTGGGAAAT SEQ ID NO:31K15R11R CACCGGAAGAGGAGTAGCTGAC SEQ ID NO:32TaqmanK15R11 FAM‑5‑ATCTCCTCAGCTGAGATGAC‑3‑BHQ‑MGB SEQ ID NO:33。 |
地址 |
201416 上海市奉贤区新林路1111号13幢355室 |