发明名称 一种香榧芽体内源激素的检测方法
摘要 本发明提供了一种香榧芽体内源激素的检测方法,将香榧花芽用提取液浸提后过固相萃取柱,浓缩,在96孔酶标板中分别加入标准物、待测样和加有抗体的稀释液,每孔50μl,洗版4次,将加入酶标二抗的稀释液中加入酶标板,每孔加100μl,在湿盒内,37℃下,温育0.5h,洗板,称取邻苯二胺溶于底物缓冲液中溶解,并添加30%H<sub>2</sub>0<sub>2</sub>,在每孔中加100μl,放入湿盒内,显色适当后每孔加入50μl2mol/L硫酸终止反应,测定标准物各浓度和各样品490nm处的OD值,计算结果。本发明方法操作简单,准确度高,回收率高,且方便、快速、安全、成本低廉的特点,在植物激素测定方面具有推广使用价值。
申请公布号 CN104749383A 申请公布日期 2015.07.01
申请号 CN201510092900.8 申请日期 2015.03.02
申请人 浙江农林大学 发明人 梅丽;吴家胜;黄坚钦;刘颖坤
分类号 G01N33/74(2006.01)I 主分类号 G01N33/74(2006.01)I
代理机构 四川君士达律师事务所 51216 代理人 芶忠义
主权项 一种香榧芽体内源激素的检测方法,其特征在于:具体包括以下步骤:1)采集香榧花芽置于提取液中4℃过夜浸提,3500转/min离心15min,取上清液;2)上清液过C‑18固相萃取柱,萃取液浓缩,除去甲醇用稀释液定容;3)在96孔酶标板中分别加入标准物、待测样和加有抗体的稀释液,每孔50μl;4)洗版4次,将加入酶标二抗的稀释液中加入酶标板,每孔加100μl,在湿盒内,置37℃下,温育0.5h,洗板;5)称取邻苯二胺溶于底物缓冲液中溶解,并添加30%H202,,在每孔中加100μl,放入湿盒内,显色适当后每孔加入50μl 2mol/L硫酸终止反应;6)在酶联免疫分光光度计上依次测定标准物各浓度和各样品490nm处的OD值。
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