一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的制备及其应用

摘要

本发明公开了一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的制备及其应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明是将嗜酸热硫矿硫化叶菌Sulfolobus acidocaldarius ATCC 33909麦芽寡糖基海藻糖合成酶表面疏水区域相关的氨基酸残基进行取代。所得突变体实现了麦芽寡糖基海藻糖合成酶可溶性表达量不同程度的提高，突变体L96T、L96H、M106K、M106H、I520H、I520R、L96T/M106K麦芽寡糖基海藻糖合成酶可溶性表达量分别提高了169.37％、16.19％、145.32％、92.38％、7.14％、9.37％、203.97％。突变体可溶性表达的提高利于其工业化应用。

主权项

一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体，其特征在于，通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的蛋白表面疏水区域相关氨基酸残基进行取代后得到；所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述取代是将第96位亮氨酸突变为苏氨酸或组氨酸，或将第106位甲硫氨酸突变为赖氨酸或组氨酸，或将第374位脯氨酸突变为谷氨酸或组氨酸，或将第520位异亮氨酸突变为组氨酸或精氨酸，或将第96位亮氨酸突变为苏氨酸的同时将第106位甲硫氨酸突变为赖氨酸。