一种迷迭香组培体系的建立方法

摘要

本发明公开了一种迷迭香组培体系的建立方法，迷迭香（Rosemarinus officinalis）系唇形科迷迭香属多年生常绿亚灌木，其植株富含酚、酮、酸、萜类等多种化合物，具有很强的抗氧化作用，在抗疲劳、抗衰老、抗抑郁和抗癌等方面具有良好的发展前景，是一种很好的经济型植物。利用植物组织培养技术提高其繁殖速度和规模,从而实现迷迭香种苗的工厂化生产。本发明以带芽茎段为外植体，经过诱导、增殖、生根以及炼苗移栽等步骤成功地获得了迷迭香组织培养再生植株,建立了系统的迷迭香组织培养植株再生体系。

主权项

一种迷迭香组培体系的建立方法，其特征在于包括以下步骤：（1）外植体消毒：采集回来的茎段以淸水冲洗10～30min后并用毛刷轻轻刷去上面的杂质,在超净工作台中用70%～80%乙醇溶液中消毒10～30s，后用无菌水洗3～5次，再用5%～10%安替富民溶液漂洗5～10min，用无菌水冲洗4～6次后用无菌滤纸吸去水分后备用;（2）诱导培养：将步骤（1）消毒好的茎段按成对芽为一个单位切成约1.5cm长的茎段，剪去茎段底部处理过程中褐化部分，接种到诱导培养基中进行芽诱导培养,接种后先在25～28℃条件下全暗培养3～10天，然后置于每天光照10～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃的条件下培养直至形成不定芽;   （3）增殖培养：将步骤（2）培养得到的芽苗，从基部切取芽并转入增殖培养基上进行继代培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养2～3天，然后置于每天光照11～15小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃的条件下培养，30天继代一次;   （4）生根培养：将步骤（2）或（3）的芽苗长至1.5～2.5cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养2～3天，然后置于每天光照14～16小时，光照强度为3000～5000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根;（5）炼苗移栽：将长至3～4cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入由泥炭土:蛭石＝1：1混合成的基质中于每天光照10～12小时，光照强度为3000～5000lx，培养温度为25～28℃，空气湿度为80%～90%的培养箱中培养5～7天，然后移栽定植于大田中。