同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测引物对、试剂盒及方法

摘要

本发明提供了一种同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测引物对、试剂盒及方法。引物对包括CYVCV检测引物对：CYVCV-4f/CYVCV--4r；CCDaV检测引物对：CCDV-2f/CCDV-2r；COX基因检测引物对：Ant1/Sen1。同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测方法，包括步骤：(1)提取柑橘待测样品的总核酸；(2)将提取到的总核酸进行多重PCR扩增；(3)对扩增产物进行检测是否含有CYVCV、CCDaV和COX基因的扩增片段，从而判断样品是否感染CYVCV或CCDaV。本发明方法检测特异性强，灵敏度高，稳定性好，工序简单，节约成本，适用于大规模推广。

主权项

一种同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测引物对，其特征在于：包括CYVCV检测引物对：CYVCV‑4f/CYVCV‑‑4r；CCDaV检测引物对：CCDV‑2f/CCDV‑2r；COX基因检测引物对：Ant1/Sen1；所述引物对的序列如下：CYVCV‑4f：5’‑ATTACAGTGGTAGGGAGGAG‑3’，CYVCV‑4r：5’‑CCCAGCAGGACGAGTTAG‑3’，CCDV‑2f：5’‑ACAAGACTATCATAGCACGAGACG‑3’，CCDV‑2r：5’‑TTTGAACTGTTTAAGTCCATCCC‑3’，Ant1：5’‑CAATATCATTGATGTCCAATACT‑3’，Sen1：5’‑ATTTATGTAATGGATTTAAGACCC‑3’。