一种磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子及其制备方法

摘要

本发明公开了一种磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子及其制备方法，是以表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子作为载体，以两种蛋白质作为模板分子，将模板分子固定在磁性载体表面，在3-氨丙基三乙氧基硅烷和辛基三甲基硅烷的作用下，形成聚合物，再将聚合物中的模板分子洗脱下来，得到的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子。本发明制得的磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子，材料成本低廉，制备简单，分离快速，更易实现规模化地对复杂生物体系中多种高丰度蛋白质组分的同时高效地选择性去除和富集。

主权项

一种磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下操作：1)以目标蛋白质为模板分子，在反应缓冲液中，将模板分子、表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子和功能单体充分混合均匀，然后在20～35℃下聚合反应5～24h；其中，模板分子与表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子的质量比为40～80:150～300，表面氨基功能化的超顺磁性纳米粒子与功能单体的质量比为150～300:200～500；所述的模板分子为血清白蛋白和血红蛋白，以质量比计，血清白蛋白：血红蛋白＝1:0.8～1.2；所述的功能单体为3‑氨丙基三乙氧基硅烷和辛基三甲基硅烷；本功能单体还能起到交联剂的作用；所述的反应缓冲液为pH＝7.0的Tris‑HCl缓冲液，Tris‑HCl缓冲液中功能单体的质量浓度为2.4～8.9％，模板分子的质量浓度为0.19～0.36％；待反应完成后，分离出聚合反应后的固态聚合物，得到结合有模板分子的磁性分子印迹纳米粒子；所述的固态聚合物的分离为：反应完成后，在外加磁场下将固体产物吸附，固液分离，然后用超纯水洗涤收集到的固态聚合物至洗出液呈中性；2)以0.01～0.1mol/L的碱性溶液作为洗脱液，对结合有模板分子的磁性分子印迹纳米粒子洗脱2～8h，将模板分子洗脱下来，得到磁性双模板蛋白质分子印迹纳米粒子。