一种用于糖基分离的微流控凝集素芯片及其制备方法

摘要

本发明涉及微流控芯片，具体的说是一种微流控芯片的制备和修饰方法。本发明主要是通过微机电技术设计制作一种微流控芯片，将溶解后的细菌纤维素在微通道里面再生，作为芯片通道柱的填料，并在经过亲水性修饰的填料表面固定凝集素，依据凝集素对糖基的特异性亲和作用将糖蛋白、脂多糖等表面含特定糖基的物质分离开来。该芯片由玻璃基材构成，以紫外蚀刻技术在基材上刻蚀通道图形，程序控温进行高温键合。该芯片上设有进分离样品进出口和填料进出口、细菌纤维素填料柱、样品微通道和在线监测位点。本发明的主要优点是以再生的细菌纤维素作为芯片填料，其作用优异，凝集素固定步骤简便，光谱监测方便，糖基分离效显著。

主权项

一种用于糖基分离的微流控凝集素芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，绘制通道图形，将设计好的通道图形打印在胶片上制成掩膜；步骤二，采用紫外刻蚀的方法将掩模板上的图形转移到玻璃盖片[12]上；步骤三，将经过刻蚀后的玻璃盖片[12]在超声波打孔机下于通道末端位置打孔，形成通道出入口，将打孔后的玻璃盖片[12]经过清洗后置于浓硫酸中活化，并与玻璃基底[13]键合，冷却后酸洗；步骤四，将细菌纤维素进行碱化处理，离心浸泡中和干净，粉碎，过筛，乙醇活化干燥后于溶剂中溶解，封闭样品入口[1]和样品出口[7]，然后将溶解后的细菌纤维素由填料入口注入微型柱[4]的位置，冷冻干燥使再生细菌纤维素蓬松将柱子填满，清洗干净；步骤五，向样品入口[1]和样品出口[7]中注溶解后的高取代羟丙基纤维素进行通道改性，过夜室温放置后洗干净；步骤六，选定凝集素，封闭填料入口[2]和填料出口[5]，调节环氧氯丙烷pH，再将环氧氯丙烷于样品入口[1]通入通道中，放置，然后在凝集素等电点条件下，将凝集素溶于TBS缓冲液后于样品入口[1]通入通道中；步骤七，封闭填料入口[2]和填料出口[5]，将糖基物质溶解于磷酸缓冲溶液，并于样品入口[1]中通入芯片进行分离，后将光谱扫描仪置于芯片柱前监测点[3]、柱后监测点[6]上方进行在线检测；其中整个过程中以聚四氟乙烯管[10]作为进样管道。