一种卵母细胞或胚胎冻存复苏的方法及其使用的复苏液

摘要

本发明提供了一种卵母细胞或胚胎冻存复苏的方法及其使用的复苏液，所述卵母细胞或胚胎冻存复苏的方法包括卵母细胞或胚胎快速冷冻过程和复苏过程，所述复苏过程包括：复苏前，先将复苏液和培养装置预热，将预热好的1号复苏液注入到培养装置中，并放在显微镜下；取出载体管，将卵母细胞或胚胎排出到1号复苏液中；将卵母细胞或胚胎在1号复苏液中均衡，在复苏基础液中均衡两次；将卵母细胞或胚胎进行洗脱，然后转移到新鲜的培养基中；所述1号复苏液的蔗糖浓度大于所述2号复苏液的蔗糖浓度。本发明的技术方案能够更好地保护卵母细胞或胚胎，有效地提高卵母细胞或胚胎经过快速玻璃化冷冻后的复苏存活率。

主权项

一种卵母细胞或胚胎冻存复苏的方法，其特征在于：包括卵母细胞或胚胎的快速冷冻过程和复苏过程，所述复苏过程包括以下步骤：步骤1）：在玻璃化冷冻保存的卵母细胞或胚胎复苏前，先将2号复苏液预热达到25‑27℃，注入到培养装置A中，得到2号复苏液A；然后将预热达到25‑27℃的复苏基础液注入到培养装置B和培养装置C中，分别得到复苏基础液B和复苏基础液C；将1号复苏液保持密封进行预热，并将培养装置预热，预热温度均为36~39度，预热时间大于30min，将预热好的1号复苏液注入到预热好的培养装置中，并将培养装置放在显微镜下；步骤2）：取出载体管，并将含有卵母细胞或胚胎的部分浸入到1号复苏液中，将含有卵母细胞或胚胎的混合液排出到1号复苏液中；步骤3）：将1号复苏液注入到2号复苏液A的底部，将卵母细胞或胚胎转移注入到1号复苏液的上面，然后再在卵母细胞或胚胎的上面注入1号复苏液，静置2~5min；步骤4）：将1号复苏液注入到复苏基础液B的底部，将卵母细胞或胚胎转移注入到1号复苏液的上面，然后再在卵母细胞或胚胎的上面注入1号复苏液，静置3~10min；步骤5）：将1号复苏液注入到复苏基础液C的底部，将卵母细胞或胚胎转移注入到1号复苏液的上面，然后再在卵母细胞或胚胎的上面注入1号复苏液，静置3~10min；步骤6）：将卵母细胞或胚胎进行洗脱，然后转移到新鲜的培养基中；所述1号复苏液的蔗糖摩尔浓度大于所述2号复苏液的蔗糖摩尔浓度。