| 主权项 |
一种同时分析检测动物组织中残留兽药组分的方法，所述残留兽药组分为吡哌酸、麻保沙星、培氟沙星、氧氟沙星、依诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、单诺沙星、洛美沙星、奥比沙星、双氟沙星、沙拉沙星、斯帕沙星、西诺沙星、恶喹酸、萘啶酸、氟甲喹、磺胺、乙酰磺胺、磺胺嘧啶、磺胺二甲异嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲嘧啶、三甲氧苄胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲噻唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺二甲异恶唑、磺胺苯甲酰、磺胺苯吡唑、磺胺氯哒嗪、乙胺嘧啶、磺胺多辛、磺胺喹恶啉、氨苯砜、苯乙醇胺A、金刚烷胺、金刚乙胺、阿莫西林或乙氧基喹啉；其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)制备样品溶液：每5g捣碎后的动物组织样品按照以下方法处理得到样品溶液：称取5g捣碎后的动物组织样品于离心管中，加入6mL 2.0mmol/L乙酸铵水溶液，9mL体积比4：1的乙腈+乙醇混合液，高速充分匀浆，混匀后超声提取5min，离心，取上清液A，剩余残渣加入15mL体积比4：1的乙腈+乙醇混合液，超声提取5min，离心、取上清液B与上清液A合并，得提取液，加入15mL正己烷，混匀后离心，得下层清液体，取其中7.5mL，经0.22μm滤膜过滤到带刻度的离心管中，40℃水浴下氮气吹至1～1.2mL，加入200μL DMSO后，用2.0mmol/L乙酸铵水溶液定容至1.5mL刻度线，得样品溶液；(2)将步骤(1)所得的样品溶液经超高效液相色谱‑串联质谱联用仪检测，得样品溶液的超高效液相色谱图，色谱条件为：以碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径≤5μm；梯度洗脱：流动相A为含体积分数0.1％的甲酸的甲醇溶液，流动相B为含体积分数0.1％的甲酸的水溶液；色谱柱温度为40℃；进样量10μL，流速为0.3mL/min；质谱条件为：ESI正负离子同时扫描模式，毛细管电压分别为3.5kV和3.0kV，源温145℃，去溶剂气温度：450℃；去溶剂气氮气流速：900L/h；锥孔气氮气流速：50L/h；碰撞气体：氩气3.3×10<sup>‑3</sup>mba；多反应监测模式检测；(3)绘制标准曲线：取吡哌酸、麻保沙星、培氟沙星、氧氟沙星、依诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、单诺沙星、洛美沙星、奥比沙星、双氟沙星、沙拉沙星、斯帕沙星、西诺沙星、恶喹酸、萘啶酸、氟甲喹、磺胺、乙酰磺胺、磺胺嘧啶、磺胺二甲异嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲嘧啶、三甲氧苄胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲噻唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺二甲异恶唑、磺胺苯甲酰、磺胺苯吡唑、磺胺氯哒嗪、乙胺嘧啶、磺胺多辛、磺胺喹恶啉、氨苯砜、苯乙醇胺A、金刚烷胺、金刚乙胺、阿莫西林、乙氧基喹啉的标准品，配制成不同浓度的混合的标准工作液，按照步骤(2)相同条件进行测试，得标准工作液的超高效液相色谱图，分别对各个标准品，按照其浓度和峰面积，绘制标准曲线，分别得到上述46种标准品的标准曲线；(4)根据步骤(2)中样品溶液的超高效液相色谱图中各待测成分的峰面积及其对应的标准品的标准曲线，计算出样品溶液中各待测成分的浓度，以公式(1)计算得到动物组织样品中各待测成分的含量：X＝(1.5mL×C/7.5mL×30mL)/M＝6mL×C/M×100％……(1)X——动物组织样品中待测成分的含量，单位μg/kgC——根据标准曲线得到样品溶液中待测成分的浓度，单位ng/mLM——动物组织样品的质量，单位g；所述步骤(2)中，所述梯度洗脱的程序如下表所示：<img file="FDA0000630483010000031.GIF" wi="1845" he="891" /> |
