发明名称 |
海水养殖中5种弧菌的NASBA-微孔板检测试剂盒及检测方法 |
摘要 |
海水养殖中5种弧菌的NASBA-微孔板检测试剂盒及检测方法,该试剂盒包括酶混合液和含正义引物和反义引物的反应液,还包括5种探针溶液,5种探针溶液分别为副溶血弧菌探针溶液,溶藻弧菌探针溶液,哈维氏弧菌探针溶液,创伤弧菌探针溶液,鳗弧菌探针溶液,检测方法为裂解液抽提总RNA,用反应液扩增总RNA得到NASBA扩增产物,同时在微孔板进行各探针包被,NASBA扩增产物与探针杂交显色反应,然后检测A405nm的吸收值,该检测试剂盒灵敏、特异,检测时操作方便,可现场快速检测出海水养殖中5种弧菌。 |
申请公布号 |
CN103834723B |
申请公布日期 |
2015.06.24 |
申请号 |
CN201310706485.1 |
申请日期 |
2013.12.19 |
申请人 |
宁波大学 |
发明人 |
陈炯;史雨红 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 |
代理人 |
程晓明 |
主权项 |
海水养殖中5种弧菌的NASBA‑微孔板检测试剂盒,该NASBA‑微孔板试剂盒包括酶混合液和含正义引物、反义引物的反应液,其特征在于还包括5种探针溶液,所述正义引物为引物gyrB‑R,所述反义引物为引物gyrB‑F1和引物gyrB‑F2,所述5种探针溶液分别为含有生物素标记的探针Vpa‑probe的副溶血弧菌探针溶液,含有生物素标记的探针Val‑probe的溶藻弧菌探针溶液,含有生物素标记的探针Vha‑probe的哈维氏弧菌探针溶液,含有生物素标记的探针Vvu‑probe的创伤弧菌探针溶液,含有生物素标记的探针Van‑probe的鳗弧菌探针溶液,各引物和探针的核苷酸序列分别如下:引物gyrB‑R:AATTCTAATA CGACTCACTA TAGGGAGA GTCATGATGA TGATGTTGTG;引物gyrB‑F1:GACTGTCAGG AAAAAGATCC;引物gyrB‑F2:CGTGAAGCGG CGCGTAAAGC;探针Vpa‑probe:CAGCTAAGCA GGGTCGTAAT;探针Val‑probe:GTACAACCCG GACAAGCTTC;探针Vha‑probe:GCTATCTTCT CAAGAAGTAG C;探针Vvu‑probe:CTGATCACTG CACTAGGTTG;探针Van‑probe:AAAACCAAGC GATTTTGCCA。 |
地址 |
315211 浙江省宁波市江北区风华路818号 |