发明名称 体外培养诱导淋巴细胞制备MHCⅡ类分子的方法及应用
摘要 本发明公开一种操作简单、成本低、产量高、原料用量少、避免产品携带外源病毒及其他病源微生物的体外培养诱导淋巴细胞制备MHCII类分子的方法,包括如下步骤:用脾脏或外周血制备淋巴细胞单层;对淋巴细胞单层进行传代培养;当传代淋巴细胞长成单层后,用刀豆蛋白A、脂多糖、植物血凝素、人参皂苷、美洲商陆及肿瘤刺激剂中的至少两种丝裂原诱导培养48小时,丝裂原加入量为5~10ug/mL;将细胞培养物经超声破碎后取样检测MHCⅡ类分子的浓度。所制备的MHCⅡ类分子,可在提高动物免疫力饲料添加剂中应用。
申请公布号 CN102719507B 申请公布日期 2015.06.24
申请号 CN201210232629.X 申请日期 2012.07.06
申请人 江苏三仪生物工程有限公司 发明人 江国托;刘艳;林洋
分类号 C12P21/02(2006.01)I;A23K1/16(2006.01)I 主分类号 C12P21/02(2006.01)I
代理机构 大连非凡专利事务所 21220 代理人 闪红霞
主权项 一种体外培养诱导淋巴细胞制备MHCⅡ类分子的方法,其特征在于包括如下步骤:a. 用脾脏或外周血制备淋巴细胞单层;b. 对淋巴细胞单层进行传代培养;c. 当传代淋巴细胞长成单层后,加入溶解过滤后的刀豆蛋白A、美洲商陆和人参皂苷诱导培养48小时,加入量分别是刀豆蛋白A 5μg/mL、美洲商陆2μg/mL和人参皂苷1μg/mL;d. 将细胞培养物经超声破碎后取样检测MHCⅡ类分子的浓度。
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