一种键合多糖型亲水色谱固定相及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及一种硅胶固载多糖型亲水色谱固定相及其制备方法与应用，其结构为：其中SiO₂为硅胶，saccharide为聚糖，分子量范围从几百到几万。本发明提供了上述固定相材料的制备方法，利用羰基二咪唑(CDI)作为连接臂，将硅胶表面进行修饰并与聚糖在水溶液体系中键合，以制备键合多糖型的色谱固定相。该固定相得制备方法对比于传统的键合糖型固定相更为高效，方便，环保。同时具有很好的分离选择性，重复性和稳定性。对于分离其他类型的极性化合物有很大的应用潜在性，在糖的分离和修饰糖蛋白组学都将有很广泛的应用。

主权项

一种键合多糖型亲水色谱固定相，其特征在于，其化学结构式：其中SiO₂为硅胶，saccharide为聚糖，n为大于1的自然数；所述的键合多糖型亲水色谱固定相的制备方法，其具体步骤为：(1)硅胶预处理硅胶加入质量分数为1～40％的盐酸或硝酸溶液中，加热回流搅拌1～48小时，过滤，水洗至中性，于100～160℃下干燥至恒重；得到活化硅胶；(2)硅胶表面修饰将步骤(1)制得的活化硅胶置于玻璃或者聚四氟乙烯反应容器中，在氮气氛围下加入有机溶剂，搅拌均匀，滴加硅烷试剂，保持温度为20～200℃条件下搅拌2～48小时；待反应体系冷却至室温，减压过滤并用甲苯，丙酮，甲醇水，甲醇洗涤，固体产品在60～100℃条件下干燥12～36小时；得到固体产物；(3)键合连接臂过程将步骤(2)所得固体产物加入到含有羰基二咪唑的无水二氧六环溶液的混合溶液中，搅拌均匀，保持温度为10～40℃条件下搅拌1～24小时；反应结束后减压过滤并用无水二氧六环溶液洗涤，固体产品在60～100℃条件下干燥12～36小时；得到中间产物；(4)键合聚糖过程将步骤(3)所得中间产物与聚糖水溶液混合，搅拌均匀，保持温度为10～100℃条件下搅拌1～120分钟；反应结束后减压过滤并用水洗涤，固体产品在60～100℃条件下干燥12～36小时；得到最终的产物键合多糖型亲水色谱固定相。