一种生物活性多肽LPLP及其制备和应用

摘要

本发明涉及蛋白领域，具体涉及一种具有体外抗氧化活性和提高机体免疫力的乳源性生物活性多肽LPLP，其氨基酸序列为Leu-Pro-Leu-Pro。经过体外抗氧化实验、体外免疫功能促进实验，验证了多肽LPLP具有较好的抗氧化生物学活性和促进细胞免疫的活性：一方面能够清除机体内的自由基，减少自由基对人体的伤害；另一方面，本发明的生物活性多肽LPLP还能够增强巨噬细胞的吞噬功能，提高机体抵御外界病原体感染的能力，降低机体发病率，而且不会引起机体的免疫排斥反应。对开发具有抗氧化功能及增强免疫功能的乳制品、保健品以及药物具有十分重要的意义。

主权项

一种氨基酸序列为Leu‑Pro‑Leu‑Pro的生物活性多肽的制备方法，步骤如下：1)发酵：将瑞士乳杆菌CICC6024添加到脱脂乳中进行厌氧发酵，获得瑞士乳杆菌发酵乳，所述厌氧发酵的条件为：发酵温度36～38℃，发酵时间15～20h；2)多肽的粗提：对步骤1)的瑞士乳杆菌发酵乳进行低温离心分离，取上清液，所述低温离心的条件为：4℃，8000～10000rpm，离心15～30min；3)多肽的纯化：a.对步骤2)的上清液进行超滤处理，收集滤液；b.收集的滤液采用反向层析柱SOURSE 5 RPC ST进行反相高效液相色谱分离，收集生物活性多肽LPLP；反相高效液相色谱分离法中，收集分子量为439.29Da的多肽的洗脱峰，即为生物活性多肽LPLP；步骤3)a所述超滤法所采用的滤膜的截留分子量分别为10kDa和3kDa；所述超滤过程中，压力范围为0.1～0.3MPa，滤液流速为0.8～1.2mL/min。